2025/03/20 更新

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コウガ ダイスケ
甲賀 大輔
KOGA Daisuke
所属
医学部 医学科 基礎医学講座 解剖学講座(顕微解剖学分野)
外部リンク

学位

  • 博士(医学) ( 2007年3月   新潟大学 )

  • 博士 (医学) ( 新潟大学 )

研究キーワード

  • 細胞・組織

  • 細胞分裂

  • 立体構造

  • 解剖学

  • 細胞

  • オスミウム浸軟法

  • ゴルジ装置

  • 細胞小器官

  • 走査電子顕微鏡

  • 下垂体

  • 組織

  • 細胞微細形態学

  • 電子顕微鏡

  • SEM

研究分野

  • ライフサイエンス / 解剖学

  • ライフサイエンス / 解剖学

  • ライフサイエンス / 形態、構造

経歴

  • 北海道大学 大学院医学院 非常勤講師

    2017年 - 現在

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  • 旭川医科大学   准教授

    2015年5月 - 現在

  • 旭川医科大学 医学部   顕微解剖学分野   准教授

    2015年5月 - 現在

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  • 新潟大学   顕微解剖学分野   講師

    2013年7月 - 2015年4月

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  • 新潟大学   顕微解剖学分野   助教

    2007年10月 - 2013年6月

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所属学協会

  • 下垂体研究会

    2012年4月 - 現在

  • 日本解剖学会

    2006年4月 - 現在

  • 日本顕微鏡学会

    2005年4月 - 現在

  • 下垂体研究会

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  • 日本解剖学会

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  • 日本顕微鏡学会

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委員歴

  • Biomedical Research (Tokyo)誌 編集委員  

    2019年 - 現在   

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    団体区分:学協会

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  • 日本顕微鏡学会   和文誌「顕微鏡」編集委員  

    2019年 - 現在   

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    団体区分:学協会

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  • 日本解剖学会   評議員  

    2018年 - 現在   

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  • 日本顕微鏡学会   北海道支部役員  

    2017年 - 現在   

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  • 日本解剖学会   走査電子顕微鏡分科会幹事  

    2016年 - 現在   

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  • 日本解剖学会   学術委員会委員  

    2016年 - 2019年   

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    団体区分:学協会

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  • 日本顕微鏡学会   技術認定委員  

    2014年 - 現在   

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  • 下垂体研究会   評議員  

    2013年 - 現在   

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    団体区分:学協会

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  • 日本顕微鏡学会   代議員  

    2013年 - 2016年   

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    団体区分:学協会

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  • 日本顕微鏡学会   関東支部役員  

    2012年 - 2014年   

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    団体区分:学協会

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論文

  • Secretion Bias of Lamellar Granules Revealed by Three-Dimensional Electron Microscopy. 査読

    Ishida-Yamamoto A, Yamanishi H, Igawa S, Kishibe M, Kusumi S, Watanabe T, Koga D

    Journal of Investigative Dermatology   2023年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • A point mutation in GPI-attachment signal peptide accelerates the development of prion disease 査読

    Atsushi Kobayashi, Tetsuya Hirata, Taishi Shimazaki, Yoshiko Munesue, Keisuke Aoshima, Takashi Kimura, Junko Nio-Kobayashi, Rie Hasebe, Atsuko Takeuchi, Yuichi Matsuura, Satoshi Kusumi, Daisuke Koga, Yasushi Iwasaki, Taroh Kinoshita, Shirou Mohri, Tetsuyuki Kitamoto

    Acta Neuropathologica   2023年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Monitoring of Post-Brain Injuries By Measuring Plasma Levels of Neuron-Derived Extracellular Vesicles 査読

    Naoshi Hotta, Takahiro Tadokoro, John Henry, Daisuke Koga, Keisuke Kawata, Hiroyuki Ishida, Yuko Oguma, Akihiro Hirata, Masato Mitsuhashi, Kenji Yoshitani

    Biomarker Insights   2022年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Polyvinyl alcohol coating prevents platelet adsorption and improves mechanical property of polycaprolactone-based small-caliber vascular graft 査読

    Naohiro Wakabayashi, Takumi Yoshida, Kyohei Oyama, Daisuke Naruse, Masahiro Tsutsui, Yuta Kikuchi, Daisuke Koga, Hiroyuki Kamiya

    Frontiers in Cardiovascular Medicine   2022年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Mutant GNAS limits tumor aggressiveness in established pancreatic cancer via antagonizing the KRAS-pathway. 査読

    Kawabata H, 他

    Journal of Gastroenterology   57 ( 3 )   208 - 220   2022年5月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1007/s00535-021-01846-4.

  • Applications of Scanning Electron Microscopy Using Secondary and Backscattered Electron Signals in Neural Structure. 招待 査読

    Koga D, Kusumi S, Shibata M, Watanabe T

    Frontiers in Neuroanatomy   2021年12月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.3389/fnana.2021.759804. eCollection 2021.

  • Novel concept for the epaxial/hypaxial boundary based on neuronal development. 査読 国際誌

    Hiroshi Nagashima, Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Katsuki Mukaigasa, Hiroyuki Yaginuma, Tatsuo Ushiki, Noboru Sato

    Journal of anatomy   237 ( 3 )   427 - 438   2020年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Trunk muscles in vertebrates are classified as either dorsal epaxial or ventral hypaxial muscles. Epaxial and hypaxial muscles are defined as muscles innervated by the dorsal and ventral rami of spinal nerves, respectively. Each cluster of spinal motor neurons passing through dorsal rami innervates epaxial muscles, whereas clusters traveling on the ventral rami innervate hypaxial muscles. Herein, we show that some motor neurons exhibiting molecular profiles for epaxial muscles follow a path in the ventral rami. Dorsal deep-shoulder muscles and some body wall muscles are defined as hypaxial due to innervation via the ventral rami, but a part of these ventral rami has the molecular profile of motor neurons that innervate epaxial muscles. Thus, the epaxial and hypaxial boundary cannot be determined simply by the ramification pattern of spinal nerves. We propose that, although muscle innervation occurs via the ventral rami, dorsal deep-shoulder muscles and some body wall muscles represent an intermediate group that lies between epaxial and hypaxial muscles.

    DOI: 10.1111/joa.13219

    PubMed

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  • 【「切片SEM法」の基礎と生物学・医学生物学研究への応用】切片SEM法と連続切片SEM法

    久住 聡, 甲賀 大輔, 柴田 昌宏, 渡部 剛

    顕微鏡   55 ( 1 )   18 - 22   2020年4月

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    記述言語:日本語   出版者・発行元:(公社)日本顕微鏡学会  

    切片SEM法は、新たな走査電子顕微鏡(SEM)イメージング技法であり、スライドガラスに貼り付けた樹脂包埋組織切片から反射電子(BSE)像を観察する手法である。この手法では、高度なミクロトーム技術を必要とすることなく、透過電子顕微鏡のような超薄切片像を取得することができる。そこで本稿では、私たちが独自に開発した3つの切片SEM法、1)準超薄切片から超薄像をイメージする手法(準超薄切片SEM法)、2)蛍光像と準超薄切片BSE像の相関顕微鏡観察法(CLEM法)、3)凍結薄切法(徳安法)との組み合わせ法、について紹介する。さらに、新たな3Dイメージング技法である「連続切片SEM法」についても紹介し、切片のSEMイメージング技術の可能性について考察する。(著者抄録)

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    その他リンク: https://search.jamas.or.jp/index.php?module=Default&action=Link&pub_year=2020&ichushi_jid=J04085&link_issn=&doc_id=20200528350003&doc_link_id=10.11410%2Fkenbikyo.55.1_18&url=https%3A%2F%2Fdoi.org%2F10.11410%2Fkenbikyo.55.1_18&type=J-STAGE&icon=https%3A%2F%2Fjk04.jamas.or.jp%2Ficon%2F00007_2.gif

  • β3 adrenergic receptor blockade reduces mortality in endotoxin-induced heart failure by suppressing induced nitric oxide synthase and saving cardiac metabolism. 査読 国際誌

    Kawaguchi S, Okada M, Ijiri E, Koga D, Watanabe T, Hayashi K, Kashiwagi Y, Fujita S, Hasebe N

    Am J Physiol Heart Circ Physiol   318 ( 2 )   H283-H294   2020年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1152/ajpheart.00108.2019

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  • Optimizing the reaction temperature to facilitate an efficient osmium maceration procedure. 査読

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Tsuyoshi Watanabe

    Biomedical research (Tokyo, Japan)   41 ( 4 )   161 - 168   2020年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    The osmium maceration method is a powerful technique for observing the three-dimensional ultrastructure of cellular organelles by scanning electron microscopy. In the conventional osmium maceration method, tissues are immersed in a diluted osmium tetroxide solution for several days at 20°C to remove soluble cytosolic proteins from the freeze-cracked surface of cells, and the optimal duration of this process is dependent on the cell type. To improve the efficiency of the osmium maceration procedure, we have examined systematically the relationship between the reaction temperature and time of the osmium maceration procedure. Treatment at temperatures higher than 20°C drastically shortened the time required to remove cytosolic proteins from the freeze-cracked surface of specimens with optimal durations for the osmium maceration of hepatocytes at 30, 40, 50 and 60°C being 30, 15, 5 and 1 h, respectively. Considering the stability and reproducibility of the macerated specimens, we concluded that the most appropriate temperature was 30 to 40°C. This rapid osmium maceration procedure was used successfully to observe the 3D ultrastructure of Purkinje cells in the cerebellum and proximal convoluted tubule cells in the kidney. This simple and reproducible rapid osmium maceration protocol should find wide appeal for the 3D analysis of cellular organelles in various cell types.

    DOI: 10.2220/biomedres.41.161

    PubMed

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  • Culture in 10% O2 enhances the production of active hormones in neuro-endocrine cells by up-regulating the expression of processing enzymes 査読

    Sato E, Maeda Y, Sato Y, Hinata A, Gomi H, Koga D, Torii S, Watanabe T, Hosaka M

    Biochemical Journal   476   827 - 842   2019年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Three-dimensional configuration of apical epithelial compartments including stem cell niches in guinea pig cheek teeth 査読

    Seino Y, Nakatomi M, Ida-Yonemochi H, Koga D, Ushiki T, Ohshima H

    Journal of Oral Biosciences   61   55 - 63   2019年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Three-dimensional configuration of apical epithelial compartments including stem cell niches in guinea pig cheek teeth. 査読 国際誌

    Yuta Seino, Mitsushiro Nakatomi, Hiroko Ida-Yonemochi, Daisuke Koga, Tatsuo Ushiki, Hayato Ohshima

    Journal of oral biosciences   61 ( 1 )   55 - 63   2019年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    OBJECTIVES: Continuously growing rodent incisors have an apically located epithelial stem cell compartment, known as an "apical bud" (AB). Few studies have described the morphological features of ABs and stem cell niches in continuously growing premolars/molars. We attempted to clarify the relationship between the three-dimensional configuration of ABs and the stem cell niches in guinea pig cheek teeth. METHODS: We perfusion-fixed four-week-old guinea pigs, then decalcified their premolars/molars to produce serial paraffin sections, which we immunostained for Sox2. We reconstructed the serial sections using image processing and analysis software. We processed undecalcified samples for scanning electron microscopy by KOH digestion. RESULTS: Two types of epithelia with M and Δ shapes surrounded the S-shaped dental papilla in the apical region of the premolars/molars, and there were three Sox2-positive epithelial bulges above the M- and Δ-shaped epithelia. Sox2-positive epithelial stem cell niches were restricted to the apical side, and cell proliferation and differentiation immediately proceeded in the crown-analogue dentin. The Sox2-positive epithelial stem cell niches were sparsely distributed and extended to the occlusal side. We also detected continuously proliferating cells in the cervical loop and Hertwig's epithelial root sheath of the root-analogue dentin. CONCLUSIONS: Our findings suggest that guinea pig cheek teeth have three ABs, and the complex configuration of these types of teeth may be attributed to the prompt formation of crown-analogue dentin followed by the long-term formation of root-analogue dentin.

    DOI: 10.1016/j.job.2019.01.002

    PubMed

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  • The integral function of the endocytic recycling compartment is regulated by RFFL-mediated ubiquitylation of Rab11 effectors 査読

    Sato E, Maeda Y, Sato Y, Hinata A, Gomi H, Koga D, Torii S, Watanabe T, Hosaka M

    Journal of Cell Science   132   2019年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • The extra dimension.

    Koga D

    Impact   Volume 2019   46 - 47   2019年

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    記述言語:英語  

    DOI: 10.21820/23987073.2019.4.46

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  • The integral function of the endocytic recycling compartment is regulated by RFFL-mediated ubiquitylation of Rab11 effectors. 査読

    Sakai R, Fukuda R, Unida S, Aki M, Ono Y, Endo A, Kusumi S, Koga D, Fukushima T, Komada M, Okiyoneda T

    J. Cell Sci.   132   pii: jcs228007   2019年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

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  • Culture in 10% O2 enhances the production of active hormones in neuro-endocrine cells by up-regulating the expression of processing enzymes. 査読

    Sato E, Maeda Y, Sato Y, Hinata A, Gomi H, Koga D, Torii S, Watanabe T, Hosaka M

    Biochem. J.   476   827 - 842   2019年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1042/BCJ20180832

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  • Impaired processing of prohormones in secretogranin III-null mice causes maladaptation to an inadequate diet and stress 査読

    Yoshinori Maeda, Saki Kudo, Ken Tsushima, Eri Sato, Chisato Kubota, Aika Kayamori, Hiroki Bochimoto, Daisuke Koga, Seiji Torii, Hiroshi Gomi, Tsuyoshi Watanabe, Masahiro Hosaka

    Endocrinology   159 ( 2 )   1213 - 1227   2018年2月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Oxford University Press  

    Secretogranin III (SgIII), a member of the granin family, binds bothtoanother granin, chromogranin A (CgA), and to a cholesterol-rich membrane that is destined for secretory granules (SGs). The knock down of Sg III in adrenocorticotropic hormone (ACTH)-producingAtT-20cellslargelyimpairs the regulated secretion of CgA and ACTH. To clarify the physiological roles of SgIII in vivo, we analyzed hormone secretion and SG biogenesis in newly established SgIII-knockout (KO) mice. Although the SgIII-KO mice were viable and fertile and exhibited no overt abnormalities under ordinary rearing conditions, a high-fat/high-sucrose diet caused pronounced obesity in the mice. Furthermore, in the SgIII-KO mice compared with wild-type (WT) mice, the stimulated secretionofactive insulin decreased substantially, whereas the storage of proinsulin increased in the islets. The plasma ACTH was also less elevated in the SgIII-KO mice than in the WT mice after chronic restraint stress, whereas the storage level of the precursor proopiomelanocortin in the pituitary gland was somewhat increased. These findings suggest that the lack of SgIII causes maladaptation of endocrine cells to an inadequate diet and stress by impairing the proteolytic conversion of prohormones in SGs, whereas SG biogenesis and the basal secretion of peptide hormones under ordinary conditions are ensured by the compensatory upregulation of other residual granins or factors.

    DOI: 10.1210/en.2017-00636

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  • Differential effects of depot formulations of GnRH agonist leuprorelin and antagonist degarelix on the seminiferous epithelium of the rat testis 査読

    Hori J, Koga D, Kakizaki H, Watanabe T

    Biomedical Research   39   197 - 214   2018年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Correlative light and scanning electron microscopy (CLSEM) by combining Tokuyasu cryosectioning technique with osmium maceration method 招待

    Koga D, Kusumi S, Watanabe T

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会(シンポジウム)   2018年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

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  • Combination of a cryosectioning method and section scanning electron microscopy for immuno-scanning electron microscopy 査読

    Satoshi Kusumi, Daisuke Koga, Tsuyoshi Watanabe, Masahiro Shibata

    Biomedical Research (Japan)   39 ( 1 )   21 - 25   2018年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Biomedical Research Foundation  

    We describe a novel immuno-scanning electron microscopy (SEM) technique that combines both Tokuyasu’s cryosectioning and section SEM methods. In this technique, semithin cryosections, cut according to the Tokuyasu method, were adhered to glass microscope slides, immunostained for bio-molecules of interest and observed by confocal laser scanning microscopy. The same sections were subsequently embedded in epoxy resin and ultrathin sections were cut on an ultramicrotome. These were then observed by SEM using a backscattered electron detector. Correlation between immunofluorescence and SEM images was performed in the same area of the cryosection. Immuno-SEM was also performed using a FluoroNanogold-labeled secondary antibody. This novel immuno-SEM method can provide ultrastructural information of cell organelles in relation to associated molecules, such as Golgi- and ER-associated proteins. This novel immuno-SEM technique has the potential to be widely used.

    DOI: 10.2220/biomedres.39.21

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  • Differential effects of depot formulations of GnRH agonist leuprorelin and antagonist degarelix on the seminiferous epithelium of the rat testis. 査読

    Hori J, Koga D, Kakizaki H, Watanabe T

    Biomed. Res.   39   197 - 214   2018年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.2220/biomedres.39.197

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  • Backscattered electron imaging of resin-embedded sections. 招待 査読 国際誌

    Koga D, Kusumi S, Watanabe T

    Microscopy   67   196 - 206   2018年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1093/jmicro/dfy028

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  • The ultrastructural characteristics of porcine hepatocytes donated after cardiac death and preserved with warm machine perfusion preservation 査読

    Hiroki Bochimoto, Naoto Matsuno, Yo Ishihara, Tatsuya Shonaka, Daisuke Koga, Yoshiki Hira, Yuji Nishikawa, Hiroyuki Furukawa, Tsuyoshi Watanabe

    PLOS ONE   12 ( 10 )   e0186352   2017年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:PUBLIC LIBRARY SCIENCE  

    The effects of warm machine perfusion preservation of liver grafts donated after cardiac death on the intracellular three-dimensional ultrastructure of the organelles in hepatocytes remain unclear. Here we analyzed comparatively the ultrastructure of the endomembrane systems in porcine hepatocytes under warm ischemia and successive hypothermic and midthermic machine perfusion preservation, a type of the warm machine perfusion. Porcine liver grafts which had a warm ischemia time of 60 minutes were perfused for 4 hours with modified University of Wisconsin gluconate solution. Group A grafts were preserved with hypothermic machine perfusion preservation at 8 degrees C constantly for 4 hours. Group B grafts were preserved with rewarming up to 22 degrees C by warm machine perfusion preservation for 4 hours. An analysis of hepatocytes after 60 minutes of warm ischemia by scanning electron microscope revealed the appearance of abnormal vacuoles and invagination of mitochondria. In the hepatocytes preserved by subsequent hypothermic machine perfusion preservation, strongly swollen mitochondria were observed. In contrast, the warm machine perfusion preservation could preserve the functional appearance of mitochondria in hepatocytes. Furthermore, abundant vacuoles and membranous structures sequestrating cellular organelles like autophagic vacuoles were frequently observed in hepatocytes after warm machine perfusion preservation. In conclusion, the ultrastructure of the endomembrane systems in the hepatocytes of liver grafts changed in accordance with the temperature conditions of machine perfusion preservation. In addition, temperature condition of the machine perfusion preservation may also affect the condition of the hepatic graft attributed to autophagy systems, and consequently alleviate the damage of the hepatocytes.

    DOI: 10.1371/journal.pone.0186352

    Web of Science

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  • Brachylaima ezohelicis sp nov (Trematoda: Brachylaimidae) found from the land snail Ezohelix gainesi, with a note of an unidentified Brachylaima species in Hokkaido, Japan 査読

    Minoru Nakao, Tsukasa Waki, Mizuki Sasaki, Jason L. Anders, Daisuke Koga, Mitsuhiko Asakawa

    PARASITOLOGY INTERNATIONAL   66 ( 3 )   240 - 249   2017年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:ELSEVIER IRELAND LTD  

    In the Japanese Archipelago, Ezohelix gainesi, a member of bradybaenid land snails, is endemic mainly to the island of Hokkaido. During July to August of 2016, a survey to detect trematode infections from E. gainesi was carried out at a forest city park in Asahikawa, Hokkaido. Systemic infections of the snails with sporocysts containing short-tailed cercariae were found in 5.3% of 94 individuals examined. Furthermore, most of them (90.4%) harbored non-encysted metacercariae within their kidneys. A DNA sequence identification revealed that both of the sporocyst and the metacercaria belong to an unknown species of the family Brachylaimidae. The metacercariae showed a genetic diversity with 6 haplotypes of mitochondrial DNA (mtDNA) even in the limited sampling area. A definitive host of the unknown species could not be determined, although 34 field mice (Apodemus speciosus) and 21 voles (Myodes rufocanus) from the city park were examined for intestinal parasites. To examine the adult stage, the metacercariae were perorally administrated to mice, together with anti-inflammatory treatment with methylprednisolone. Fully matured adult worms were recovered from the intestinal ileum 8 and 14 days postinfection. The gravid adults showed typical features of the genus Brachylaima. A morphological and biogeographical evaluation prompted us to propose Brachylaima ezohelicis sp. nov. for the parasite from E. gainesi. The autochthony of the first intermediate host and the spatial heterogeneity of mtDNA suggest that the new species found in the city park is not a recently expanded population of immigrant origin. (C) 2017 Elsevier B.V. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.parint.2017.01.015

    Web of Science

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  • Novel scanning electron microscopy methods for analyzing the 3D structure of the Golgi apparatus 招待 査読

    Daisuke Koga, Tatsuo Ushiki, Tsuyoshi Watanabe

    ANATOMICAL SCIENCE INTERNATIONAL   92 ( 1 )   37 - 49   2017年1月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:SPRINGER  

    The structure of the Golgi apparatus has been extensively examined by light and electron microscopy, but details of its three-dimensional (3D) structure have remained unclear because of the technical limitations of conventional microscopy techniques. To overcome this problem, we have developed several novel scanning electron microscopy (SEM) methods for observing the 3D structure of subcellular organelles including the Golgi apparatus: (1) an osmium maceration method that facilitates SEM observation of membranous organelles, including the Golgi apparatus, by selectively removing soluble cytoplasmic proteins, (2) an osmium impregnation/maceration method that combines an osmium impregnation method with the osmium maceration method to determine the polarity of the Golgi apparatus by SEM, (3) a correlative light and SEM method that combines a cryosectioning technique with the osmium maceration method to enable correlation of the immunocytochemical distribution of molecules with the 3D ultrastructure of the Golgi apparatus, and (4) array tomography based on the systematic collection and integration of SEM images of serial ultrathin sections on glass slides for revealing the 3D ultrastructure of the entire Golgi apparatus. Together, the novel SEM techniques listed above can reveal the complete 3D structure of the Golgi apparatus in different cell types.

    DOI: 10.1007/s12565-016-0380-8

    Web of Science

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  • Changes in the three-dimensional ultrastructure of membranous organelles in male rat pituitary gonadotropes after castration 査読

    Daisuke Koga, Hiroki Bochimoto, Satoshi Kusumi, Tatsuo Ushiki, Tsuyoshi Watanabe

    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO   38 ( 1 )   1 - 18   2017年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:BIOMEDICAL RESEARCH PRESS LTD  

    The increased discharge of gonadotropin releasing hormone (GnRH) from hypothalamic neurons after castration specifically stimulates pituitary gonadotropes. To elucidate the putative effects of GnRH on the three-dimensional ultrastructure of gonadotropes, we examined osmium-macerated pituitary tissues of male rats at various time points after castration by high resolution scanning electron microscopy (SEM) combined with immunocytochemistry. Two days after castration, the Golgi apparatus was disassembled into small stacks; patch-like, tubuloreticular clusters of endoplasmic reticulum (ER) membranes were present; and spherically enlarged mitochondria were accumulated in the central area of the stimulated gonadotropes. These acute changes were indiscernible by 1 week after castration, and then the pituitary gonadotropes of castrated animals gradually became hypertrophic, finally exhibiting the characteristic "signet-ring" appearance, with markedly dilated cisterns of the rough ER. Upon SEM observation, the inner surface of the cavity was mostly flat, and openings connecting adjacent lumens of the ER were sparse. Proliferation of the osmiophilic tubular network of the ER-Golgi intermediate compartment was observed in the persistently stimulated gonadotropes, indicating a marked increase in trafficking of secretory proteins between the Golgi and ER. The acute and chronic changes in the gonadotropes after castration revealed in the present study by SEM provide evidence for a putative link between the intracellular signaling events evoked by GnRH and the ultrastructural dynamics of the organelles of the secretory pathway.

    DOI: 10.2220/biomedres.38.1

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  • Three-dimensional reconstruction of root cells and interdental cells in the rat inner ear by serial section scanning electron microscopy 査読

    Ryusuke Shodo, Manabu Hayatsu, Daisuke Koga, Arata Horii, Tatsuo Ushiki

    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO   38 ( 4 )   239 - 248   2017年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:BIOMEDICAL RESEARCH PRESS LTD  

    In the cochlea, a high K+ environment in the endolymph is essential for the maintenance of normal hearing function, and the transport of K+ ions through gap junctions of the cochlear epithelium is thought to play an important role in endolymphatic homeostasis. The aim of the present study was to demonstrate the three-dimensional (3D) ultrastructure of spiral ligament root cells and interdental cells, which are located at both ends of the gap junction system of the cochlea epithelium. Serial semi-thin sections of plastic-embedded rat cochlea were mounted on glass slides, stained with uranyl acetate and lead citrate, and observed by scanning electron microscopy (SEM) using the backscattered electron (BSE) mode. 3D reconstruction of BSE images of serial sections revealed that the root cells were linked together to form a branched structure like an elaborate "tree root" in the spiral ligament. The interdental cells were also connected to each other, forming a comb-shaped cellular network with a number of cellular strands in the spiral limbus. Furthermore, TEM studies of ultra-thin sections revealed the rich presence of gap junctions in both root cells and interdental cells. These findings suggest the possibility that both root cells and interdental cells contribute to K+ circulation as the end portion of the epithelial cell gap junction system of the cochlea.

    DOI: 10.2220/biomedres.38.239

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  • Integrative method for three-dimensional imaging of the entire Golgi apparatus by combining thiamine pyrophosphatase cytochemistry and array tomography using backscattered electron-mode scanning electron microscopy 査読

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Tatsuo Ushiki, Tsuyoshi Watanabe

    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO   38 ( 5 )   285 - 296   2017年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:BIOMEDICAL RESEARCH PRESS LTD  

    Thiamine pyrophosphatase (TPPase) cytochemistry is an established method for specific labeling of the trans-Golgi cisterns in tissue sections. Herein, we combined this enzyme cytochemical method with array tomography using scanning electron microscopy (SEM), a new imaging technique based on collection of backscattered electron (BSE) images of consecutive resin-embedded sections on glass slides, to detect the entire three-dimensional (3D) organization of the Golgi apparatus with sufficient spatial resolution. As the signal intensity of BSE depends on the atomic number of the materials, lead precipitates confined to the trans-Golgi cisterns after TPPase cytochemistry were clearly observed by BSE-mode SEM. The mild fixative used for TPPase cytochemistry also enabled accurate identification of target gonadotropes in the composite pituitary tissue by immunocytochemical staining. By 3D reconstruction of the entire trans-Golgi cisterns based on serial ultrathin section images of tissues after TPPase cytochemistry, we detected ultrastructural differences in the 3D configuration of the Golgi apparatus between cerebellar Purkinje cells and pituitary gonadotropes. The appropriate combination of enzyme cytochemistry and/or immunostaining with array tomography will further clarify the relationship between the organization and functional states of the Golgi apparatus.

    DOI: 10.2220/biomedres.38.285

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  • Direct evidence for activated CD8+T cell transmigration across portal vein endothelial cells in liver graft rejection 査読

    Taro Kariya, Hisashi Ueta, Xue-Dong Xu, Daisuke Koga, Taichi Ezaki, Enqiao Yu, Satoshi Kusumi, Yusuke Kitazawa, Yasushi Sawanobori, Tatsuo Ushiki, Thomas Issekutz, Kenjiro Matsuno

    JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY   51 ( 10 )   985 - 998   2016年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:SPRINGER JAPAN KK  

    Lymphocyte recruitment into the portal tract is crucial not only for homeostatic immune surveillance but also for many liver diseases. However, the exact route of entry for lymphocytes into portal tract is still obscure. We investigated this question using a rat hepatic allograft rejection model.
    A migration route was analyzed by immunohistological methods including a recently developed scanning electron microscopy method. Transmigration-associated molecules such as selectins, integrins, and chemokines and their receptors expressed by hepatic vessels and recruited T-cells were analyzed by immunohistochemistry and flow cytometry.
    The immunoelectron microscopic analysis clearly showed CD8 beta(+) cells passing through the portal vein (PV) endothelia. Furthermore, the migrating pathway seemed to pass through the endothelial cell body. Local vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) expression was induced in PV endothelial cells from day 2 after liver transplantation. Although intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) expression was also upregulated, it was restricted to sinusoidal endothelia. Recipient T-cells in the graft perfusate were CD25(+)CD44(+)ICAM-1(+)CXCR3(+)CCR5(-) and upregulated alpha 4 beta 1 or alpha L beta 2 integrins. Immunohistochemistry showed the expression of CXCL10 in donor MHCIIhigh cells in the portal tract as well as endothelial walls of PV.
    We show for the first time direct evidence of T-cell transmigration across PV endothelial cells during hepatic allograft rejection. Interactions between VCAM-1 on endothelia and alpha 4 beta 1 integrin on recipient effector T-cells putatively play critical roles in adhesion and transmigration through endothelia. A chemokine axis of CXCL10 and CXCR3 also may be involved.

    DOI: 10.1007/s00535-016-1169-1

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  • Backscattered electron image of osmium-impregnated/macerated tissues as a novel technique for identifying the cis-face of the Golgi apparatus by high-resolution scanning electron microscopy 査読

    D. Koga, H. Bochimoto, T. Watanabe, T. Ushiki

    JOURNAL OF MICROSCOPY   263 ( 1 )   87 - 96   2016年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:WILEY-BLACKWELL  

    The osmium maceration method with scanning electron microscopy (SEM) enabled to demonstrate directly the three-dimensional (3D) structure of membranous cell organelles. However, the polarity of the Golgi apparatus (that is, the cis-trans axis) can hardly be determined by SEM alone, because there is no appropriate immunocytochemical method for specific labelling of its cis- or trans-faces. In the present study, we used the osmium impregnation method, which forms deposits of reduced osmium exclusively in the cis-Golgi elements, for preparation of specimens for SEM. The newly developed procedure combining osmium impregnation with subsequent osmium maceration specifically visualised the cis-elements of the Golgi apparatus, with osmium deposits that were clearly detected by backscattered electron-mode SEM. Prolonged osmication by osmium impregnation (2% OsO4 solution at 40 degrees C for 40 h) and osmium maceration (0.1% OsO4 solution at 20 degrees C for 24 h) did not significantly impair the 3D ultrastructure of the membranous cell organelles, including the Golgi apparatus. This novel preparation method enabled us to determine the polarity of the Golgi apparatus with enough information about the surrounding 3D ultrastructure by SEM, and will contribute to our understanding of the global organisation of the entire Golgi apparatus in various differentiated cells.
    Lay Description The Golgi apparatus consists of several layers of flattened cisternae with distinct polarity. Its entry and exit sides are termed the cis-faces (or forming) and trans-faces (or maturing), respectively. The 3D fine structure of the Golgi apparatus, as well as the rough endoplasmic reticulum and mitochondria, can be observed by scanning electron microscopy (SEM), after the soluble cytoplasmic proteins have been selectively removed from the cells by immersing the tissue samples in diluted OsO4 for several days (osmium maceration method). We have analysed the 3D organisation of the Golgi apparatus in various differentiated cells by high-resolution SEM of osmium-macerated tissues, and have demonstrated the diversity in the organisation of the Golgi apparatus. However, we have often faced difficulties in specifying the polarity of the Golgi apparatus, because there were no appropriate ways to label the cis- or trans-faces of the Golgi apparatus by SEM. To overcome this problem, in the present study, we used osmium impregnation for preparation of the specimens for SEM. Impregnation of OsO4 into tissue samples at a relatively high temperature (40 degrees C) for several tens of hours resulted in accumulation of osmium deposits exclusively in the cis-Golgi elements. The newly developed procedure combining osmium impregnation with subsequent osmium maceration specifically labelled the cis-elements of the Golgi apparatus with osmium deposits. The intensity of backscattered electron (BSE)-mode signals depends on the atomic number of the specimen composition (osmium, atomic number 76). Osmium accumulated in the cis-Golgi elements could be clearly visualised owing to the intense signals of BSE-mode SEM, compared with the low background signals of the surrounding organic compounds. Prolonged exposure to OsO4 during the impregnation and maceration processes hardly damaged the 3D fine structure of the cell organelles, including the Golgi apparatus. This novel preparation method enabled us to analyse the polarity of the Golgi apparatus by SEM, with enough information about the surrounding 3D ultrastructure. The method will contribute to our understanding of the organisation of the entire Golgi apparatus in various differentiated cells that has rarely been achieved by transmission electron microscopy.

    DOI: 10.1111/jmi.12379

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  • Three-dimensional shape of the Golgi apparatus in different cell types: serial section scanning electron microscopy of the osmium-impregnated Golgi apparatus. 招待 査読

    Koga D, Kusumi S, Ushiki T

    Microscopy   65 ( 2 )   145 - 157   2016年4月

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1093/jmicro/dfv360

  • Three-dimensional shape of the Golgi apparatus in different cell types: serial section scanning electron microscopy of the osmium-impregnated Golgi apparatus 査読

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Tatsuo Ushiki

    MICROSCOPY   65 ( 2 )   145 - 157   2016年4月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:OXFORD UNIV PRESS  

    Although many studies of the Golgi apparatus structure have been performed by light and electron microscopy, the full shape of the Golgi apparatus remained unclear due to the technical limitations of the previously applied microscopy techniques. In this study, we used serial section scanning electron microscopy (SEM) for the morphological study of the Golgi apparatus. This method is useful for three-dimensional (3D) reconstruction of cellular structures without requiring specialized instruments, unlike focused ion beam SEM (FIB-SEM) and serial block face SEM (SBF-SEM). Using the serial section SEM method developed by our laboratory, we investigate the 3D shape of the osmium-impregnated Golgi apparatus in rat epididymal cells, pancreatic acinar cells and gonadotropes. The combination of serial section SEM and a 3D reconstruction technique enabled us to elucidate the entire shape of the Golgi apparatus in these cells. The full shape of the Golgi apparatus in epididymal cells formed a basket-like structure with oval-shaped cisterns, while the Golgi apparatus in an acinar cell from the pancreas was composed of elongated ribbon-like structures that were connected to each other, making a coarse network. The overall image of the Golgi apparatus cisterns from a gonadotrope looked like a spherical cage. This study has clearly shown that entire 3D shape of the Golgi apparatus varies depending on the cell type and that the Golgi cisterns network appears as a single mass located in the large region of the cytoplasm.

    DOI: 10.1093/jmicro/dfv360

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  • Backscattered electron image of osmium-impregnated/macerated tissues as a novel technique for identifying the cis-faceof the Golgi apparatus by high-resolution scanning electron microscopy. 査読

    Koga D, Bochimoto H, Watanabe T and Ushiki T

    Journal of Microscopy   in press   2016年

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1111/jmi.12379

  • Correlative Light and Scanning Electron Microscopy for Observing the Three-Dimensional Ultrastructure of Membranous Cell Organelles in Relation to Their Molecular Components 査読

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Hiroki Bochimoto, Tsuyoshi Watanabe, Tatsuo Ushiki

    JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY & CYTOCHEMISTRY   63 ( 12 )   968 - 979   2015年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:SAGE PUBLICATIONS LTD  

    Although the osmium maceration method has been used to observe three-dimensional (3D) structures of membranous cell organelles with scanning electron microscopy (SEM), the use of osmium tetroxide for membrane fixation and the removal of cytosolic soluble proteins largely impairs the antigenicity of molecules in the specimens. In the present study, we developed a novel method to combine cryosectioning with the maceration method for correlative immunocytochemical analysis. We first immunocytochemically stained a semi-thin cryosection cut from a pituitary tissue block with a cryo-ultramicrotome, according to the Tokuyasu method, before preparing an osmium-macerated specimen from the remaining tissue block. Correlative microscopy was performed by observing the same area between the immunostained section and the adjacent face of the tissue block. Using this correlative method, we could accurately identify the gonadotropes of pituitary glands in various experimental conditions with SEM. At 4 weeks after castration, dilated cisternae of rough endoplasmic reticulum (RER) were distributed throughout the cytoplasm. On the other hand, an extremely dilated cisterna of the RER occupied the large region of the cytoplasm at 12 weeks after castration. This novel method has the potential to analyze the relationship between the distribution of functional molecules and the 3D ultrastructure in different composite tissues.

    DOI: 10.1369/0022155415609099

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  • High-resolution imaging by scanning electron microscopy of semithin sections in correlation with light microscopy 査読

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Ryusuke Shodo, Yukari Dan, Tatsuo Ushiki

    MICROSCOPY   64 ( 6 )   387 - 394   2015年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:OXFORD UNIV PRESS  

    In this study, we introduce scanning electron microscopy (SEM) of semithin resin sections. In this technique, semithin sections were adhered on glass slides, stained with both uranyl acetate and lead citrate, and observed with a backscattered electron detector at a low accelerating voltage. As the specimens are stained in the same manner as conventional transmission electron microscopy (TEM), the contrast of SEM images of semithin sections was similar to TEM images of ultrathin sections. Using this technique, wide areas of semithin sections were also observed by SEM, without the obstruction of grids, which was inevitable for traditional TEM. This study also applied semithin section SEM to correlative light and electron microscopy. Correlative immunofluorescence microscopy and immune-SEM were performed in semithin sections of LR white resin-embedded specimens using a FluoroNanogold-labeled secondary antibody. Because LR white resin is hydrophilic and electron stable, this resin is suitable for immunostaining and SEM observation. Using correlative microscopy, the precise localization of the primary antibody was demonstrated by fluorescence microscopy and SEM. This method has great potential for studies examining the precise localization of molecules, including Golgi- and ER-associated proteins, in correlation with LM and SEM.

    DOI: 10.1093/jmicro/dfv042

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  • Three-dimensional reconstruction of serial sections for analysis of the microvasculature of the white pulp and the marginal zone in the human spleen 査読

    Satoshi Kusumi, Daisuke Koga, Tatsuo Kanda, Tatsuo Ushiki

    BIOMEDICAL RESEARCH-TOKYO   36 ( 3 )   195 - 203   2015年6月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:BIOMEDICAL RESEARCH PRESS LTD  

    Although a number of papers have given useful information on splenic microcirculation by light and/or scanning electron microscopy, controversies remain as to the vascular arrangement, especially in the human spleen. The present study re-examined the microvasculature of the human spleen using a three-dimensional reconstruction of immunohistochemically stained tissue sections, and showed that the central artery does not directly issue follicular arteries in the human spleen; follicular arteries are derived from penicillar arteries outside the follicle and end in the white pulp. We found that the splenic follicle is surrounded by an elaborate system of anastomosed capillaries in both the marginal zone and the superficial layer of the white pulp. Most of these capillaries are also branches of the penicillar arterioles that are issued from the central artery in the same, or a different, white pulp system. Because the endothelia of these capillaries are widely open in the marginal zone, this vascular network may play a major role in supplying blood to the marginal zone. The accumulation of sialoadhesin-positive macrophages was also observed around the vascular network, suggesting an important role for this structure as the front line of immune response.

    DOI: 10.2220/biomedres.36.195

    Web of Science

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  • Correlative Light and Scanning Electron Microscopy for Observing the Three-Dimensional Ultrastructure of Membranous Cell Organelles in Relation to their Molecular Components. 査読

    Koga D, Kusumi S, Bochimoto H, Watanabe T, Ushiki T

    Journal of Histochemistry and Cytochemistry   63   968 - 979   2015年

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1369/0022155415609099

  • High resolution imaging by scanning electron microscopy of semithin sections in correlation with light microscopy. 招待 査読

    Koga D, Kusumi S, Shodo R, Dan Y and Ushiki T

    Microscopy   64   387 - 394   2015年

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    担当区分:筆頭著者   記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Three-dimensional reconstruction of serial sections for analysis of the microvasculature of the white pulp and the marginal zone in the human spleen. 査読

    Kusumi S, Koga D, Kanda T and Ushiki T

    Biomed Research   36   195 - 203   2015年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Functional implications of the Golgi and microtubular network in gonadotropes 査読

    Tsuyoshi Watanabe, Hiroki Bochimoto, Daisuke Koga, Masahiro Hosaka, Tatsuo Ushiki

    MOLECULAR AND CELLULAR ENDOCRINOLOGY   385 ( 1-2 )   88 - 96   2014年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:ELSEVIER IRELAND LTD  

    In contrast to the widely accepted images of the Golgi apparatus as a cup-like shape, the Golgi in pituitary gonadotropes is organized as a spherical shape in which the outer and inner faces are cis- and trans-Golgi elements, respectively. At the center of the spherical Golgi, a pair of centrioles is situated as a microtubule-organizing center from which radiating microtubules isotropically extend toward the cell periphery. This review focuses on the significance of the characteristic organization of the Golgi and microtubule network in gonadotropes, considering the roles of microtubule-dependent membrane transport in the formation and maintenance of the Golgi structure. Because the highly symmetrical organization of the Golgi is possibly perturbed in response to experimental treatments of gonadotropes, monitoring of the Golgi structure in gonadotropes under various experimental conditions will be a novel in vivo approach to elucidate the biogenesis of the Golgi apparatus. (C) 2013 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.

    DOI: 10.1016/j.mce.2013.10.003

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  • Functional Implications of the Golgi and Microtubular Network in Gonadotropes. 招待 査読

    Watanabe T, Bochimoto H, Koga D, Hosaka M and Ushiki T

    Molecular and Cellular Endocrinology.   385   88 - 96   2014年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.mce.2013.10.003

  • 連続切片SEM法とゴルジ装置の3D構造解析への応用 招待 査読

    甲賀大輔, 久住聡, 牛木辰男

    顕微鏡   49   171 - 175   2014年

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    記述言語:日本語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.11410/kenbikyo.49.3_171

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  • Three-Dimensional Morphology of Touch Domes in Human Hairy Skin by Correlative Light and Scanning Electron Microscopy 査読

    Mari Orime, Tatsuo Ushiki, Daisuke Koga, Masaaki Ito

    JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY   133 ( 8 )   2108 - 2111   2013年8月

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    記述言語:英語   出版者・発行元:NATURE PUBLISHING GROUP  

    DOI: 10.1038/jid.2013.60

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  • Sustained treatment with a GnRH agonist (Leuprorelin) affects the ultrastructural characteristics of membranous organelles in male rat pituitary gonadotropes 査読

    Hiroki Bochimoto, Daisuke Koga, Yuko Sakai, Yoshiki Hira, Masahiro Hosaka, Tatsuo Ushiki, Tsuyoshi Watanabe

    Archives of Histology and Cytology   74 ( 1 )   41 - 57   2013年7月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:Japan Society of Histological Documentation  

    Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) agonists exert acutely stimulatory action on gonadotropes, but thereafter suppress paradoxically gonadotropin synthesis and release by receptor desensitization. To examine whether GnRH signaling affects the morphological characteristics in membranous organelles related to the synthesis of gonadotropin, we have analyzed the ultrastructural changes in the ER and Golgi apparatus of male rat pituitary gonadotropes during sustained treatment with a GnRH agonist, leuprorelin. In pituitary gonadotropes at 1 day after the onset of treatment, clusters of the tubuloreticular ER appeared, and the globular Golgi apparatus was transiently disassembled into isolated small-sized stacks. However, 1 week after the onset of the treatment, the tubuloreticular ER was seemingly converted to rough ER with regularly stacked sheets and the scattered Golgi stacks converged to form globular structures. In the following chronic phase of the treatment, the ER cisterns remained flattened and the trans-Golgi compartment appeared to be collapsed. Sustained treatment with leuprorelin could also restore the enlarged Golgi apparatus and expand the cisterns of the rough ER
    a feature that was seen in hypertrophic gonadotropes of castrated rats. These findings indicated that the ultrastructure of the membranous organelles changed because of the chronic suppressive effects of leuprorelin on gonadotropes both in the physiological and stimulated states. The acute and chronic ultrastructural changes in the ER and Golgi apparatus during sustained leuprorelin treatment also suggests that GnRH signaling cross-talks with the regulation of the morphological characteristics in membranous organelles related to gonadotropin synthesis.

    DOI: 10.1679/aohc.74.41

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  • Three-dimensional ultra-structures of myelin and the axons in the spinal cord: Application of SEM with the osmium maceration method to the central nervous system in two mouse models 査読

    Taichi Nomura, Yoshio Bando, Hiroki Bochimoto, Daisuke Koga, Tsuyoshi Watanabe, Shigetaka Yoshida

    Neuroscience Research   75 ( 3 )   190 - 197   2013年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    Axonal injury and demyelination are observed in demyelinating diseases such as multiple sclerosis. However, pathological changes that underlie these morphologies are not fully understood. We examined in vivo morphological changes using a new histological technique, scanning electron microscopy (SEM) with osmium maceration method to observe three-dimensional structures such as myelin and axons in the spinal cord. Myelin basic protein-deficient shiverer mice and mice with experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) were used to visualize how morphological changes in myelin and axons are induced by dysmyelination and demyelination.SEM revealed following morphological changes during dysmyelination of shiverer mice. First, enriched mitochondria and well-developed sER in axons were observed in shiverer, but not in wild-type mice. Second, the processes from some perinodal glial cells ran parallel to internodes of axons in addition to the process that covered the nodal region of the axon in shiverer mice. Last, this technique left myelin and axonal structures undisturbed. Moreover, SEM images showed clear variations in the ultrastructural abnormalities of myelin and axons in the white matter of the EAE spinal cord. This technique will be a powerful tool for identifying the mechanisms underlying the pathogenesis in demyelination. © 2013 Elsevier Ireland Ltd and the Japan Neuroscience Society.

    DOI: 10.1016/j.neures.2013.01.009

    Scopus

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  • Three-Dimensional Morphology of Touch Domes in Human Hairy Skin by Correlative Light and Scanning Electron Microscopy. 査読

    Orime M, Ushiki T, Koga D and Ito M

    Journal of investigative Dermatology   133   2108 - 2111   2013年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

  • Three-dimensional ultra-structures of myelin and the axons in the spinal cord: Application of SEM with the osmium maceration method to the central nervous system in two mouse models. 査読

    Nomura T, Bando Y, Bochimoto H, Koga D, Watanabe T, Yoshida S

    Neuroscience Research   75   190 - 197   2013年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1016/j.neures.2013.01.009

  • Sustained treatment with a GnRH agonist (leuprorelin) affects the ultrastructural characteristics of membranous organelles in male rat pituitary gonadotropes. 査読

    Bochimoto H, Koga D, Sakai Y, Hira Y, Hosaka M, Ushiki T and Watanabe T

    Archives of Histology and Cytology   74   41 - 57   2013年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

    DOI: 10.1679/aohc.74.41

  • Morphological assessment of early axonal regeneration in end-to-side nerve coaptation models 査読

    Hiroshi Oyamatsu, Daisuke Koga, Michihiro Igarashi, Minoru Shibata, Tatsuo Ushiki

    JOURNAL OF PLASTIC SURGERY AND HAND SURGERY   46 ( 5 )   299 - 307   2012年10月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:INFORMA HEALTHCARE  

    Histological changes were observed in peripheral nerves following end-to-side nerve coaptation to determine the effects of perineurial opening and deliberate donor nerve injury during surgery. Twenty rats were randomised into four groups as follows: group 1, end-to-side nerve coaptation without perineurial opening; group 2, end-to-side nerve coaptation with simple perineurial opening; group 3, end-to-side nerve coaptation with partial crush injury after perineurial opening; group 4, end-to-side nerve coaptation with partial neurotomy after perineurial opening. Seven days after coaptation of the musculocutaneous (recipient) nerve to the ulnar (donor) nerve, the nerves were immunohistochemically analysed using antibodies against neurofilament-H (RT97) and phosphorylated GAP-43 (p-GAP-43). The former labels all axons, including regenerating axons and degenerated axonal debris, while the latter only labels regenerating axons. Results demonstrated no regenerating nerves in the recipient nerve of group 1. In group 2, because nerve herniation from the perineurial opening partially injured donor nerve fibres, some regenerating axons extended proximally and distally along the partially injured fibres in the donor nerve; some of these regenerating axons also extended into the recipient nerve via the perineurial opening. In groups 3 and 4, thin regenerating axons were more prominent in recipient and donor nerves compared with group 2. Statistical evaluation revealed increased efficacy of perineurial opening and deliberate donor nerve injury in end-to-side nerve coaptation, suggesting that partial nerve fibre herniation with partial axonotmesis or neurotomesis was important for effective axonal regeneration in end-to-side nerve coaptation.

    DOI: 10.3109/2000656X.2012.696264

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  • Tetraspanin Is Required for Generation of Reactive Oxygen Species by the Dual Oxidase System in Caenorhabditis elegans 査読

    Hiroki Moribe, Ryouji Konakawa, Daisuke Koga, Tatsuo Ushiki, Kuniaki Nakamura, Eisuke Mekada

    PLOS GENETICS   8 ( 9 )   e1002957   2012年9月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:PUBLIC LIBRARY SCIENCE  

    Reactive oxygen species (ROS) are toxic but essential molecules responsible for host defense and cellular signaling. Conserved NADPH oxidase (NOX) family enzymes direct the regulated production of ROS. Hydrogen peroxide (H2O2) generated by dual oxidases (DUOXs), a member of the NOX family, is crucial for innate mucosal immunity. In addition, H2O2 is required for cellular signaling mediated by protein modifications, such as the thyroid hormone biosynthetic pathway in mammals. In contrast to other NOX isozymes, the regulatory mechanisms of DUOX activity are less understood. Using Caenorhabditis elegans as a model, we demonstrate that the tetraspanin protein is required for induction of the DUOX signaling pathway in conjunction with the dual oxidase maturation factor (DUOXA). In the current study, we show that genetic mutation of DUOX (bli-3), DUOXA (doxa-1), and peroxidase (mlt-7) in C. elegans causes the same defects as a tetraspanin tsp-15 mutant, represented by exoskeletal deficiencies due to the failure of tyrosine cross-linking of collagen. The deficiency in the tsp-15 mutant was restored by co-expression of bli-3 and doxa-1, indicating the involvement of tsp-15 in the generation of ROS. H2O2 generation by BLI-3 was completely dependent on TSP-15 when reconstituted in mammalian cells. We also demonstrated that TSP-15, BLI-3, and DOXA-1 form complexes in vitro and in vivo. Cell-fusion-based analysis suggested that association with TSP-15 at the cell surface is crucial for BLI-3 activation to release H2O2. This study provides the first evidence for an essential role of tetraspanin in ROS generation.

    DOI: 10.1371/journal.pgen.1002957

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  • A Unique Ball-Shaped Golgi Apparatus in the Rat Pituitary Gonadotrope: Its Functional Implications in Relation to the Arrangement of the Microtubule Network 査読

    Tsuyoshi Watanabe, Yuko Sakai, Daisuke Koga, Hiroki Bochimoto, Yoshiki Hira, Masahiro Hosaka, Tatsuo Ushiki

    JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY & CYTOCHEMISTRY   60 ( 8 )   588 - 602   2012年8月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:SAGE PUBLICATIONS LTD  

    In polarized exocrine cells, the Golgi apparatus is cup-shaped and its convex and concave surfaces are designated as cis and trans faces, functionally confronting the rough endoplasmic reticulum and the cell surface, respectively. To clarify the morphological characteristics of the Golgi apparatus in non-polarized endocrine cells, the investigators immunocytochemically examined its precise architecture in pituitary gonadotropes, especially in relation to the arrangement of the intracellular microtubule network. The Golgi apparatus in the gonadotropes was not cup-shaped but ball-shaped or spherical, and its outer and inner surfaces were the cis and trans faces, respectively. Centrioles were situated at the center of the Golgi apparatus, from which radiating microtubules isotropically extended to the cell periphery through the gaps in the spherical wall of the Golgi stack. The shape of the Golgi apparatus and the arrangement of microtubules demonstrated in the present study could explain the microtubule-dependent movements of tubulovesicular carriers and granules within the gonadotropes. Furthermore, the spherical shape of the Golgi apparatus possibly reflects the highly symmetrical arrangement of microtubule arrays, as well as the poor polarity in the cell surface of pituitary gonadotropes. (J Histochem Cytochem 60:588-602, 2012)

    DOI: 10.1369/0022155412448791

    Web of Science

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  • A useful method for observing intracellular structures of free and cultured cells by scanning electron microscopy 査読

    Daisuke Koga, Masato Nakajima, Tatsuo Ushiki

    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY   61 ( 2 )   105 - 111   2012年4月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:OXFORD UNIV PRESS  

    Scanning electron microscopy (SEM) using osmium-maceration methods has been used for analyzing the three-dimensional structure of cell organelles in tissue samples, but it has been quite difficult to observe free and cultured cells with this technique. The present study was performed to develop a method that can be applied to free and cultured cells for SEM studies of intracellular structures after osmium maceration. The method was also applied to light microscopy (LM) and to transmission electron microscopy (TEM). HeLa cells and human leukocytes were fixed with a mixture of 0.5% paraformaldehyde and 0.5% glutaraldehyde followed by an additional fixation with 1% osmium tetroxide. These cells were embedded in low-melting-point agarose. A temperature-responsive dish was also used for collection of cultured cells before embedding. For LM and TEM, the cell-embedded agarose was further embedded in epoxy resin, and semi- and ultrathin sections were examined conventionally. For SEM, the agarose was freeze-fractured in 50% dimethyl sulfoxide, processed for osmium maceration and observed in a high-resolution SEM. Low-melting-point agarose was useful as an embedding medium for SEM, because it was well preserved during prolonged osmication for SEM. Thus, the fine structure of cell organelles was clearly analyzed by SEM after osmium-maceration treatment. These SEM images could also be compared with those of LM and TEM of the agarose-embedded tissues.

    DOI: 10.1093/jmicro/dfr098

    Web of Science

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  • リアルタイム3D走査電子顕微鏡の医学生物応用 招待 査読

    牛木辰男, 伊東祐博, 伊藤広, 岩田太, 甲賀大輔

    顕微鏡   45   198 - 201   2010年

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    記述言語:日本語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

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  • Trafficking of recirculating lymphocytes in the rat liver: Rapid transmigration into the portal area and then to the hepatic lymph 査読

    Xue-Dong Xu, Hisashi Ueta, Shu Zhou, Changde Shi, Daisuke Koga, Tatsuo Ushiki, Kenjiro Matsuno

    LIVER INTERNATIONAL   28 ( 3 )   319 - 330   2008年3月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:BLACKWELL PUBLISHING  

    Background: We have investigated how recirculating lymphocytes patrol the liver in a normal steady state. Methods: Thoracic duct lymphocytes of congeneic rats were intravenously transferred to host rats and donor cell trafficking in the liver and hepatic lymph was examined. Host hepatic lymph nodes (HLNs) were selectively removed, which allowed liver-derived donor cells to collect in the thoracic duct without transit in the intervening HLNs. Results: The number of donor cells in the thoracic duct lymph significantly increased over the baseline 3, 5 and 11 h after transfer in the HLN-removed, non-pretreated, and HLN-ligated ( in which a lymph efflux was blocked) groups, respectively. Histologically, donor cells appeared in the portal area from 0.5 h after transfer and frequently attached to the basal lamina of portal vein both externally and internally. Three hours after transfer, a few donor cells appeared in the subcapsular sinus of HLNs. Conclusion: The minimal transit time of rat recirculating lymphocytes is 3 - 4 h in the liver and 5 - 8 h in the hepatic LNs, in a normal steady state. Recirculating lymphocytes might transmigrate through the portal vein as well as the sinusoid in the periportal zone. This rapid transit might enable an efficient surveillance of the liver portal area by the recirculating lymphocytes.

    DOI: 10.1111/j.1478-3231.2008.01671.x

    Web of Science

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  • 走査電子顕微鏡によるゴルジ装置の形態解析 招待 査読

    甲賀大輔, 牛木辰男

    顕微鏡   43   283 - 286   2008年

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    記述言語:日本語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)  

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  • Notes on ovarian histology of a harbor seal, Phoca largha, stranded on the beach at Izumozaki, Niigata Prefecture, Sea of Japan. 査読

    Honma Y, Koga D, Ushiki T, Aoyagi A, Shindo J

    J. Jap. Drif. Soc.   5   11 - 17   2007年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:漂着物学会事務局  

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  • Three-dimensional ultrastructure of the Golgi apparatus in different cells: high-resolution scanning electron microscopy of osmium-macerated tissues 査読

    Daisuke Koga, Tatsuo Ushiki

    ARCHIVES OF HISTOLOGY AND CYTOLOGY   69 ( 5 )   357 - 374   2006年12月

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:INT SOC HISTOLOGY & CYTOLOGY  

    The three-dimensional ultrastructure of the Golgi apparatus in different cells of the rat - epithelial principal cells in the epididymal duct, goblet cells in the jejunum, gonadotrophs in the pituitary grand and dorsal root ganglion cells - was studied by scanning electron microscopy (SEM) of osmium-macerated tissues. The Golgi apparatus in the epididymal principal cells took the shape of a candle flame with irregular-shaped cisterns, while those in the goblet cells of the jejunum were cup-shaped or cylindrical with flat cisterns. Gonadotrophs had a large spherical Golgi apparatus; this apparatus was composed of several concentric cisterns with large round windows through which the rough endoplasmic reticulum (rER) and mitochondria extended into the center of the globular Golgi apparatus. Dorsal root ganglion cells had several small Golgi stacks scattered in the cytoplasm. In all Golgi apparatuses of the different cells examined in the present study, the cis-most cistern was generally composed of a flattened sheet with numerous small fenestrations on its wall. On the other hand, the shape of the trans-most cistern varied by cell type; it was generally composed of tubules and/or small sheets which were sometimes connected with each other to form a rather complicated structure. The cismost cistern and the trans-most cistern were often closely associated with the rER although no direct communication was found between them. These findings indicate that the structure of the Golgi apparatus, especially its overall shape and the ultrastructure of the trans-most cistern, varies by cell type, a point to be considered in relation to the function of the individual cells.

    DOI: 10.1679/aohc.69.357

    Web of Science

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  • SEM observation of the insect prepared by microwave irradiation 査読

    D Koga, M Ueno, S Yamashina

    JOURNAL OF ELECTRON MICROSCOPY   52 ( 5 )   477 - 484   2003年

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    記述言語:英語   掲載種別:研究論文(学術雑誌)   出版者・発行元:OXFORD UNIV PRESS  

    The ptilinum of the fly and the compound eye are among the most fragile organs encountered during conventional procedures of morphological sample fixation. in order to identify a fixative suitable for preparing such samples for scanning electron microscopy, we examined various fixation conditions using microwave irradiation (MWI). The conditions examined were: (i) fixatives; (ii) temperature; (iii) concentration; (iv) duration; (v) dehydration; and (vi) substitution. The identified optimal conditions were 5% glutaraldehydc with MWI (350 W, 5 min). The MWI was continued until the maximal temperature of 75degreesC was attained, followed by intermittent irradiation to maintain a temperature of 75degreesC. After irradiation, the sample was left at room temperature for 24 h in the fixative and then dehydrated in increasing concentrations of ethanol. Each step in the ethanol series lasted for 24 h. The final absolute ethanol step included three solution changes, with each incubation lasting 1 h. A subsequent stepwise substitution of t-butyl alcohol for ethanol was conducted by reducing the ratio of 100% ethanol to t-butyl alcohol from 2:1 to 1: 1 and then 1:2 (24 h each). The substitution was completed by three solution changes using 100% t-butyl alcohol, 30 min each. The best results were obtained by freeze-drying samples using t-butyl alcohol. The use of MWI improved fixative permeation, which occurred at a uniform rate throughout the sample. Comparison with temperature in a water bath at 75degreesC indicated that the fixation effect of MWI was due to its heat generation in addition to some unknown mechanism.

    DOI: 10.1093/jmicro/52.5.477

    Web of Science

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書籍等出版物

  • 新 電顕入門ガイドブック

    [公社]日本顕微鏡学会 電子顕微鏡技術認定委員会( 担当: 共著)

    国際文献社  2022年6月  ( ISBN:4910603050

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    記述言語:日本語   著書種別:教科書・概説・概論

  • ミクロにひそむ不思議

    牛木辰男, 甲賀大輔

    岩波書店  2008年 

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  • 細胞生物学

    牛木辰男, 堅田利明, 甲賀大輔, 木南凌, 佐々木啓子, 白土明子, 高橋悟, 中西義信, 松岡耕二, 光本篤史, 堅田利明

    廣川書店 

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MISC

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講演・口頭発表等

  • 電顕によるオルガネライメージングのニューエッジ 国際会議

    甲賀 大輔

    第45回日本分子生物学会年会  

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    開催年月日: 2022年11月 - 2022年12月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(公募)  

  • 脳の細胞内外の構造を超解像可視化技術で明らかにする

    Daisuke Koga

    NEURO2022 

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    開催年月日: 2022年6月 - 2022年7月

    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(公募)  

  • Recent applications of correlative light and electron microscopy

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Tsuyoshi Watanabe

    日本顕微鏡学会 第78回学術集会 

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    開催年月日: 2022年5月

    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(公募)  

  • SEM によるオルガネラの3D 構造解析

    甲賀大輔 久住聡 渡部剛

    第127回日本解剖学会総会・全国学術集会 

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    開催年月日: 2022年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • 連続切片SEM法によるゴルジ装置の3D構造解析

    甲賀大輔

    生体機能ボリュームデータ解析研究部会 第6回研究会 

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    開催年月日: 2022年3月

    記述言語:日本語   会議種別:口頭発表(招待・特別)  

  • オルガネラや細胞膜の特殊化した膜領域「ゾーン」研究の最前線

    甲賀 大輔, 久住 聡, 森永 涼介, 渡部 剛

    第128回日本解剖学会総会 学術集会 

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    開催年月日: 2022年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • 走査電子顕微鏡法 (SEM法) -オルガネラ3D形態解析を目指して-

    甲賀大輔

    第44回日本分子生物学会年会  

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    開催年月日: 2021年12月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(公募)  

  • オルガネラや細胞膜の特殊化した膜領域「ゾーン」研究の最前線 (日本生理学会連携シンポジウム)

    甲賀 大輔 、久住 聡 、森永 涼介 、渡部 剛

    第128回日本解剖学会総会・全国学術集会 

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    開催年月日: 2023年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:東北大学  

  • 細胞内スーパーイメージングの最先端

    甲賀大輔, 渡部剛, 中澤英子, 内山安男

    第124回日本解剖学会・全国学術集会 

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    開催年月日: 2019年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • 「医学生物学領域における SEM のこれまでとこれから」

    甲賀大輔

    顕微鏡学会関東支部講演会 

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    開催年月日: 2019年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:順天堂大学本郷キャンパス  

  • 「医学・生物学研究におけるSEMの応用」

    甲賀大輔, 渡部剛, 中澤英子, 内山安男

    形態解析ワークショップ‐多様な顕微鏡を用いて 

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    開催年月日: 2019年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:品川インターシティ  

  • 細胞内スーパーイメージングの世界

    甲賀大輔, 久住聡, 渡部剛

    第41回日本分子生物学会年会 

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    開催年月日: 2018年11月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:パシフィコ横浜  

  • 連続切片のSEM観察

    甲賀 大輔

    SCANTECH2018  東京都市大学

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    開催年月日: 2018年8月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • 下垂体研究の未来と展望

    甲賀大輔, 久住聡, 渡部剛

    下垂体研究会 

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    開催年月日: 2018年8月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:国民宿舎「桂浜荘」  

  • Microscopy冠ワークショップ受賞講演

    甲賀大輔, 久住聡, 牛木辰男

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会 

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    開催年月日: 2018年5月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:久留米シティプラザ  

  • Tokuyasu Method:An Old and New Technique 国際会議

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Tsuyoshi Watanabe

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会  久留米シティプラザ

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    開催年月日: 2018年5月

    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:久留米シティプラザ  

  • 基礎技術チュートリアル

    甲賀大輔

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会 

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    開催年月日: 2018年5月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • 先端的3Dイメージング技法によるゴルジ装置の形態的多様性の観察

    甲賀大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 牛木辰男, 渡部剛

    第121回日本解剖学会総会・全国学術集会 

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    開催年月日: 2016年3月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

    開催地:ビックパレふくしま  

  • 準超薄切片の超薄像観察法の開発と応用

    甲賀大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 渡部剛

    平成27年度日本顕微鏡学会北海道支部講演会 

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    開催年月日: 2015年12月

    記述言語:日本語   会議種別:口頭発表(招待・特別)  

  • 凍結割断による生物試料の観察

    甲賀 大輔

    SCANTECH 2015 

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    開催年月日: 2015年9月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • 蛍光免疫染色像とオスミウム浸軟SEM像の相関顕微鏡法の開発

    甲賀大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 渡部剛, 牛木辰男

    第61回東北・北海道連合支部学術集会 

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    開催年月日: 2015年8月

    記述言語:日本語   会議種別:口頭発表(一般)  

  • 連続切片走査電子顕微鏡・3D再構築法によるゴルジ装置の立体構造解析

    甲賀大輔, 久住聡, 牛木辰男

    第71回日本解剖学会学術講演会 

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    開催年月日: 2015年5月

    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

  • XXI International Symposium on Morphological Sciences 国際会議

    Koga D, Ushiki T

    XXII International Symposium on Morphological Sciences  2012年 

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    記述言語:英語   会議種別:ポスター発表  

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  • Correlative light and scanning electron microscopy for observing the three-dimensional ultrastructure of membranous cell organelles in relation to their molecular components 国際会議

    Koga D, Kusumi S, Bochimoto H, Watanabe T, Ushiki T

    XXIII International Symposium on Morphological Sciences  2013年 

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    記述言語:英語   会議種別:口頭発表(一般)  

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  • バイオ研究におけるSEMの応用 招待

    SCANTECH 2014  2014年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • 連続切片走査電子顕微鏡法・3D再構築法によるゴルジ装置の立体構造解析 招待

    甲賀大輔, 久住聡, 牛木辰男

    第70回日本顕微鏡学会学術総会  2014年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 蛍光イメージングと走査電子顕微鏡像の対比法 招待

    甲賀大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 渡部剛, 牛木辰男

    第70回日本顕微鏡学会学術総会  2014年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 走査電子顕微鏡による下垂体前葉細胞の3D微細構造解析 招待

    甲賀大輔, 牛木辰男

    第18回日本内分泌病理学会学術総会  2014年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • Serial section scanning electron microscopy and its application for the morphological analysis of the Golgi apparatus

    Koga D, Kusumi S, Ushiki T

    第120回日本解剖学会総会・全国学術集会・第92回 日本生理学会大会合同大会  2015年 

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    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 凍結割断による生物試料の観察 招待

    甲賀大輔

    SCANTECH 2015  2015年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • 連続切片走査電子顕微鏡・3D再構築法によるゴルジ装置の立体構造解析 招待

    甲賀大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 渡部剛, 牛木辰男

    第71回日本顕微鏡学会総会  2015年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 走査電子顕微鏡試料作製法

    甲賀大輔

    第72回日本顕微鏡学会学術講演会  2016年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • 医学生物学分野におけるSEMの可能性 招待

    甲賀 大輔

    医学生物学電子顕微鏡技術学会第35回学術講演会  2019年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • Three-dimensional structure of the Golgi apparatus in mammalian cells

    Daisuke Koga, Satoshi Kusumi, Tsuyoshi Watanabe

    第92回日本生化学会大会  2019年 

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    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 切片SEM法

    甲賀 大輔, 久住 聡, 渡部 剛

    第75回日本顕微鏡学会学術講演会  2019年 

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  • 最先端の3Dイメージング技法によるゴルジ装置の形態学的多様性の観察

    甲賀大輔, 久住聡, 暮地本宙己, 牛木辰男, 渡部剛

    第121回日本解剖学会総会・全国学術集会  2016年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • SEM試料作製法の基礎

    甲賀大輔

    第73回日本顕微鏡学会学術講演会  2017年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • 免疫組織化学染色切片とオスミウム浸軟組織の相関顕微鏡法 招待 国際会議

    甲賀大輔, 久住聡, 渡部剛

    第73回日本顕微鏡学会学術講演会  2017年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • SEM試料作製法

    甲賀大輔

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会  2018年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • 連続切片SEM・3D再構築法 招待

    甲賀大輔

    SCANTECH 2018  2018年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • 細胞内膜系のダイナミクス

    甲賀大輔, 渡部剛, 中澤英子, 内山安男

    第123回日本解剖学会総会・全国学術集会  2018年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 超高分解能SEMによる細胞内膜系の3Dイメージング

    甲賀大輔, 渡部剛, 中澤英子, 内山安男

    第41回日本分子生物学会年会  2018年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • Three-dimensional shape of the Golgi apparatus in different cell types:serial section scanning electron microscopy of the osmium-impregnated Golgi apparatus

    甲賀大輔, 久住聡, 牛木辰男

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会 (Microscopy冠ワークショップ, 論文賞受賞講演)  2018年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • Correlative light and scanning electron microscopy (CLSEM) by combining Tokuyasu cryosectioning technique with osmium maceration method. 招待

    Koga D, Kusumi S and Watanabe T

    第74回日本顕微鏡学会学術講演会  2018年 

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    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 超高分解能SEMによる膜性小器官の観察

    甲賀大輔, 渡部剛, 中澤英子, 内山安男

    第124回日本解剖学会総会・全国学術集会  2019年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • The shape of mitochondria analyzed by ultra-high resolution scanning electron microscopy 国際会議

    Koga D, Ushiki T

    16th International Congress of the IFAA  2004年 

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    記述言語:英語   会議種別:ポスター発表  

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  • Three-dimensional ultrastructure of the Golgi apparatus in different cells: high-resolution scanning electron microscopy of osmium-macerated tissues 招待 国際会議

    Koga D, Ushiki T

    The16th International Microscopy Congress  2006年 

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    記述言語:英語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • 走査電子顕微鏡によるゴルジ装置の極性観察-オスミウム染色法とその応用例-

    甲賀大輔, 牛木辰男

    第63回日本顕微鏡学会総会  2007年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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  • Backscattered electron imaging of osmium impregnated macerated tissues as a novel technique for identifying the cis-face of the Golgi apparatus by high-resolution scanning electron microscopy 国際会議

    Koga D, Ushiki T

    XX International Symposium on Morphological Sciences  2008年 

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    記述言語:英語   会議種別:ポスター発表  

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  • バイオ研究におけるSEMの活用 招待

    甲賀大輔, 牛木辰男

    SCANTECH2009  2009年 

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    記述言語:日本語   会議種別:公開講演,セミナー,チュートリアル,講習,講義等  

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  • Morphological change of membranous cell organelles in the gonadotroph of the rat anterior pituitary gland after castration 国際会議

    Koga D, Bochimoto H, Watanabe T, Ushiki T

    XXI International Symposium on Morphological Sciences  2010年 

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    記述言語:英語  

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  • ゴルジ装置の多様な形態と機能変化-走査電顕による立体構造解析-

    甲賀大輔, 暮地本宙己, 渡部剛, 牛木辰男

    第115回日本解剖学会学術総会  2010年 

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    記述言語:日本語   会議種別:シンポジウム・ワークショップ パネル(指名)  

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受賞

  • 日本解剖学会 第68回東北・北海道連合支部学術集会学会賞

    2022年9月   日本解剖学会 第68回東北・北海道連合支部  

    甲賀 大輔, 久住 聡, 渡部 剛

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞  受賞国:日本国

  • 日本解剖学会 東北北海道連合支部学術集会 優秀発表賞 受賞

    2019年9月   日本解剖学会  

    甲賀大輔 久住聡 渡部剛

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞  受賞国:日本国

  • 優秀発表賞

    2019年9月   日本解剖学会 東北北海道連合支部学術集会  

    甲賀 大輔

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞 

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  • Microscopy論文賞

    2018年5月   日本顕微鏡学会  

    甲賀大輔

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    受賞区分:学会誌・学術雑誌による顕彰  受賞国:日本国

  • 論文賞受賞

    2018年5月   Microscopy (欧文誌)  

    甲賀大輔

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    受賞区分:学会誌・学術雑誌による顕彰 

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  • 日本顕微鏡学会 奨励賞(生物系応用研究部門)

    2016年6月   日本顕微鏡学会  

    甲賀 大輔

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    受賞区分:国内外の国際的学術賞  受賞国:日本国

  • 奨励賞受賞

    2016年5月   日本顕微鏡学会  

    甲賀大輔

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  • 日本解剖学会奨励賞

    2016年3月   日本顕微鏡学会  

    甲賀 大輔

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞  受賞国:日本国

  • 奨励賞受賞

    2016年3月   日本解剖学会  

    甲賀大輔

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  • ポスター賞受賞

    2015年2月   第39回日本顕微鏡学会 関東支部講演会  

    甲賀大輔

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞 

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  • 優秀発表賞受賞

    2012年8月   第27回日本下垂体研究会学術集会  

    甲賀大輔

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞 

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  • ポスター賞

    2012年2月   XXII International Symposium on Morphological Sciences  

    甲賀大輔

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    受賞区分:国際学会・会議・シンポジウム等の賞 

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  • “Pietro Motta” Award 受賞

    2010年9月   XXII International Symposium on Morphological Sciences  

    甲賀大輔

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    受賞区分:国際学会・会議・シンポジウム等の賞 

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  • ポスター賞受賞

    2009年5月   第65回日本顕微鏡学会学術総会  

    甲賀大輔

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞 

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  • 市民選出最優秀賞

    日本顕微鏡学会写真コンクール(日本顕微鏡学会第63回学術講演会)  

    甲賀大輔

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    受賞区分:国内学会・会議・シンポジウム等の賞 

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共同研究・競争的資金等の研究課題

  • iPS細胞を用いたSIFDの病態解明と治療法開発のための基盤研究

    2024年4月 - 2027年3月

    基盤研究(C)

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    Sideroblastic anemia with B-cell immunodeficiency, fevers, and developmental delay (SIFD)の病態解明を目指した基盤研究。

  • 独創的3D電顕イメージングで探る神経細胞ゴルジ体の集合化と分散化のメカニズム

    2024年4月 - 2027年3月

    基盤研究(C)

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    神経細胞Golgi体の基本的構造を解明し、その構造学的知見を基に、生後発達過程における神経細胞Goli体の高次構造獲得過程と、病態時のGolgi体の崩壊メカニズムの解明を目指した研究。

  • リポソームを捕捉したマクロファージの MDSC 様細胞への変容に関わる分子基盤の解明

    2023年4月 - 2026年3月

    基盤研究(C)

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    マクロファージに取り込まれたリポソームがどのような細胞内シグナル変化を引き起こし骨髄由来免疫抑制細胞(MDSC)誘導に至るのかを解明する研究。

  • リポソームを捕捉したマクロファージのMDSC様細胞への変容に関わる分子基盤の解明

    研究課題/領域番号:23K07243  2023年4月 - 2026年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(C)

    吉田 陽一郎, 東 寛, 佐藤 雅之, 甲賀 大輔, 長森 恒久, 青山 藍子, 酒井 宏水, 石羽澤 映美

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    配分額:4,160,000円 ( 直接経費:3,200,000円 、 間接経費:960,000円 )

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  • フラビウイルス蛋白質量恒常性維持の分子機構解明

    2022年4月 - 2026年3月

    基盤研究(B)

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    デングウイルス(DENV)や日本脳炎ウイルス(JEV)などのフラビウイルスは、宿主の小胞体関連分解 (endoplasmic reticulum (ER) associated degradation (ERAD)) システムによって、各ウイルス蛋白質の量比が制御されている。このシステムにおいて、どのように成熟した非構造蛋白質が選択的に分解されるのか、または分解阻害に伴うウイルス増殖抑制の分子機構などいくつかの不明な点が残されている。
    本研究では、どのような機構により一部のウイルス因子のみがERADによって選択的分解を受けるのか?不要蛋白質の蓄積がなぜウイルスの複製を抑制するのか?
    類似の機構は細胞に備わっているのか?など、まだ明らかにされていない部分について解析を進め、新たな抗ウイルス戦略開発に繋がる分子基盤の解明を目指す。

  • フラビウイルス蛋白質量恒常性維持の分子機構解明

    研究課題/領域番号:22H02873  2022年4月 - 2026年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(B)

    森田 英嗣, 甲賀 大輔

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    配分額:17,160,000円 ( 直接経費:13,200,000円 、 間接経費:3,960,000円 )

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  • ゴルジ体の動態解明に基づく糖鎖修飾の制御

    2021年10月 - 2027年3月

    戦略的創造研究推進事業 (JST CREST)

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    糖鎖修飾の舞台としてのゴルジ体に着目し、その微細構造の時空間ダイナミクスと糖タンパク質の輸送経路を精密探査するものである。さらに、ゴルジ体の形成とカーゴ分子の選別輸送の分子機構を解明することにより、分泌経路の設計原理を理解し、その過程で得られた知見を基にタンパク質の糖鎖修飾を制御することを目指す。

  • 糖転移酵素の局在と基質タンパク質の選別輸送による糖鎖修飾プログラムの解明

    研究課題/領域番号:23K21358  2021年4月 - 2025年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(B)

    矢木 宏和, 甲賀 大輔

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    配分額:17,290,000円 ( 直接経費:13,300,000円 、 間接経費:3,990,000円 )

    昨年度までに最適化した超解像顕微鏡および電子顕微鏡の条件を活用し、培養細胞における糖転移酵素のゴルジ体内の詳細な局在を明らかにした。具体的には、Apexを融合した糖転移酵素を利用して、糖転移酵素の近傍の分子にビオチン標識を行い本標識をプローブとすることで、電子顕微鏡像において糖転移酵素の局在を明らかにすることに成功した。
    特異的な糖鎖修飾を担う糖転移酵素の局在の要因を明らかにするために、近接依存性標識法により10種類を超える糖転移酵素の近傍分子の同定に成功した。また、蛍光タンパク質を融合した糖転移酵素をプローブとして、ゴルジ体分画小胞をセルソータで分離することに成功した。プロテオミクス解析により、こうしたゴルジ小胞に含まれるタンパク質を同定するとで、糖転移酵素と局在を共にする分子を明らかにすることができた。
    一方で、哺乳動物細胞にフコース転移酵素9(FUT9)を過剰発現させるとLAMP-1に特異的にLewis X糖鎖の修飾が認められたことを契機として、LAMP-1中の29残基からなるセグメントがFUT9との相互作用を規定することを見出した。本セングメントは、他の糖タンパク質のC末端に連結させただけで、FUT9依存的なLewis X修飾をもたらすことから、糖鎖修飾を制御する分子コードとして活用できる可能性を示した。

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  • 糖転移酵素の局在と基質タンパク質の選別輸送による糖鎖修飾プログラムの解明

    研究課題/領域番号:21H02625  2021年4月 - 2025年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業  基盤研究(B)

    矢木 宏和, 甲賀 大輔

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    配分額:17,290,000円 ( 直接経費:13,300,000円 、 間接経費:3,990,000円 )

    本年度は、ゴルジ体に存在する糖転移酵素の局在を明らにすることを目指して、各種電子顕微鏡画像(オスミウム浸軟法、免疫電子顕微鏡法、光・電子相関顕微鏡観察法)を取得するための固定化方法をはじめ試料調製条件の検討を行った。これにより、HEK293TやHeLa細胞といった培養動物細胞を対象にゴルジ体の電子顕微鏡3次元像を得ることに成功した。
    細胞内において輸送過程にある糖タンパク質のみを選択的に観察するために、ビオチンの添加によって小胞体からの搬出を制御するRetention using selective hooksシステムを構築した。
    モデル糖タンパク質として用いたエリスロポエチン(EPO)の細胞内の局在を調べた。パスポート配列の付加によりEPOがゴルジ体内の異なる領域に滞留するようになることを見出した。一方、パスポート配列付加によりEPOのガラクトシル化が亢進することも明らかとなった。近接依存性標識により、パスポート配列を付加したEPOとガラクトース転移酵素(B4GalT1)のいずれの近傍にも存在し得る分子としてNUCB1、NUCB2を同定した。興味深いことに、NUCB1の発現抑制によって、パスポート配列に依存したEPOのガラクトシル化とシアリル化の亢進が減弱することが明らかとなった。

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  • 負荷で顕在化するホルモン分泌不全の謎:グラニン蛋白欠損マウスから生活習慣病に迫る

    研究課題/領域番号:20H03411  2020年4月 - 2024年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    渡部 剛, 甲賀 大輔, 穂坂 正博

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    配分額:17,550,000円 ( 直接経費:13,500,000円 、 間接経費:4,050,000円 )

    内分泌細胞の分泌顆粒へのペプチドホルモンの選択的な輸送・蓄積過程には、グラニン蛋白と総称される一群の可溶性酸性蛋白の関与が示唆されてきたが、複数のグラニン蛋白の存在による機能的冗長性のために、その生理的意義については未だ不明な点が多い。そこで、本研究課題では、このグラニン蛋白の生理的意義の解明を目指して、2系統の代表的なグラニン蛋白、セクレトグラニンII (Sg2)およびセクレトグラニンIII (Sg3)の遺伝子欠損マウス (KOマウス) を作成し、ホルモン分泌需要を増大させた場合に顕在化する内分泌学的不全症状を解析している。2021年度には、2020年度までに研究分担者の穂坂正博が新規に確立したSg2-KOマウスを高脂肪/高糖質食で飼育し、体重増加曲線の変化や耐糖能異常の有無などを検討した。その結果、既に得られているSg3-KOマウスと同様に、高脂肪/高糖質食で膵島β細胞に負荷をかけると、顕著な肥満や耐糖能の異常など2型糖尿病様の症候が顕在化することが明らかになった。この解析と並行して、やはり代表的なペプチド性内分泌組織である下垂体前葉でグラニン蛋白欠損による影響の有無を明らかにすべく、野生型マウスを比較対象として、Sg2-KO、Sg3-KOマウスの下垂体組織における遺伝子発現の変化をDNAマイクロアレイで比較・解析した。その結果、Sg2-KO、Sg3-KOのどちらのグラニン欠損マウスの下垂体でも、下垂体前葉ホルモン遺伝子の発現が全般的かつ顕著に低下(野生型と比較して50-25%)していることが明らかになった。この実験結果から、グラニン蛋白の欠損は視床下部性の下垂体前葉ホルモン放出ホルモンの分泌障害を誘発するのではないかと考え、視床下部-下垂体系の神経分泌細胞におけるグラニン蛋白の発現様式の詳細な解析に着手した。

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  • 内分泌細胞における入出力の会合点・一次線毛-ゴルジ連携ゾーンの機能的意義の解明

    研究課題/領域番号:20H04896  2020年4月 - 2022年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 新学術領域研究(研究領域提案型)  新学術領域研究(研究領域提案型)

    甲賀 大輔

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    配分額:7,020,000円 ( 直接経費:5,400,000円 、 間接経費:1,620,000円 )

    本年度も引き続き、「一次線毛-ゴルジ連携ゾーンの形態学的解析」を行った。
    1.連続切片SEM(走査電子顕微鏡)・3D再構築法による下垂体前葉ホルモン産生細胞の一次線毛・ゴルジ連携ゾーンの解析: 前年度の性腺刺激ホルモン産生(LH/FSH)細胞の解析に加え、本年度は成長ホルモン産生(GH)細胞、乳腺刺激ホルモン(PRL)細胞、甲状腺刺激ホルモン(TSH)細胞、副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)細胞の一次線毛とゴルジ装置の近接関係(連携ゾーン)の形態学的解析を行った。本研究では、親水性樹脂であるLR white樹脂を用いることで、下垂体各前葉ホルモン産生細胞を免疫電顕法(金コロイド標識)により正確に同定した上で3D形態解析を行った。各ホルモン産生細胞に特異な「一次線毛・ゴルジ装置連携ゾーンの3D形態」と「一次線毛と線毛ポケットの空間的関係性」について解明することができた。
    2.3D免疫電顕法の開発: 連続切片SEM法は、細胞内のオルガネラの3D構造解析や、細胞内でのオルガネラの空間的分布解析に有効な手法である。近年、この連続切片法に免疫電顕法を組み合わせた新たな手法の開発に成功している。この手法を用いることで、オルガネラの3D像に目的の機能分子の局在を加味したモデルを作製することが可能となった。
    3.オルガネラ観察法の開発と応用: 走査電顕によるオルガネラ観察法の開発とその応用について論文報告した。細胞内をダイレクトに観察できる唯一の手法である「オスミウム浸軟法」、切片を走査電顕で観察する「切片SEM法」、切削した樹脂包埋連続超薄切片を基板に載せ、それを走査電顕で観察後、目的構造を再構築する「連続切片SEM法」、光顕像と電顕像の分解能ギャップを埋める「CLEM法」などの手法を解説し、オルガネラ研究への応用を示した。

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  • 内分泌細胞における入出力の会合点・一次線毛-ゴルジ連携ゾーンの機能的意義の解明

    2020年 - 2021年

    日本学術振興会  新学術領域研究 (研究領域提案型) 

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者 

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  • 先端的イメージング技術で解き明かす下垂体前葉細胞に特異な一次線毛の存在意義

    2019年4月 - 2022年3月

    基盤研究(C)

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    下垂体前葉内分泌細胞には一次線毛が存在するが、その機能や形態学的詳細は不明なままである。下垂体前葉は、少なくても5種類の内分泌細胞が混在する複雑な組織であるため、各細胞を正確に同定した上で、線毛の機能・構造解析が重要となる。申請者がこれまで開発してきた先端的な走査電子顕微鏡(SEM)・3D解析法は、複雑な細胞構成の組織中で特定の細胞を同定し、その3D微細構造を明らかにすることができる。そこで本研究では、この新たな3D技法を駆使し、下垂体前葉内分泌細胞の一次線毛の形態的多様性、および発生・分化・成長に伴う一次線毛の構築起点を細胞の機能成熟と関連させて明らかにする。さらに、SEMによる革新的な「細胞表面レセプター局在解析法」も新たに確立し、下垂体前葉組織に特異な一次線毛の存在意義を解明する。

  • 先端的3Dイメージング技術で解き明かす下垂体前葉細胞に特異な一次線毛の存在意義

    研究課題/領域番号:19K07261  2019年4月 - 2022年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者 

    配分額:4,290,000円 ( 直接経費:3,300,000円 、 間接経費:990,000円 )

    1. 連続切片SEM(走査電子顕微鏡)・3D再構築法による下垂体前葉ホルモン産生細胞の3D形態解析: 昨年度に続き、下垂体前葉各ホルモン産生細胞(成長ホルモン産生[GH]細胞、乳腺刺激ホルモン産生[PRL]細胞、性腺刺激ホルモン産生[LH/FSH]細胞、甲状腺刺激ホルモン産生[TSH]細胞、副腎皮質刺激ホルモン産生[ACTH]細胞)一次線毛の3D形態解析を行い、「ゴルジ装置と一次線毛」、「一次線毛と線毛ポケット」の3D微細形態・空間的関係性に注目して、各細胞に特異なゴルジ装置や一次線毛の形状を明らかにした。
    2. 下垂体前葉細胞3Dアトラスの構築: オスミウム浸軟法(オルガネラをダイレクトにSEMで観察することができる手法)と連続切片SEM法による3Dイメージング技法を併用し、各前葉細胞の3D形態解析を行った。両手法により得られた3Dイメージング像をアーカイブ化し、各ホルモン産生細胞の3Dアトラスを構築している。今後、論文として報告する予定である。
    3.3D免疫電顕法の開発: 連続切片SEM法は、細胞内に広がるオルガネラの3D構造や、オルガネラ同士の空間的分布解析に有効な手法である。この連続切片SEM法に免疫電顕法を組み合わせた新たな手法の開発に成功している。この手法を用いることで、オルガネラの3D像に目的の機能分子の局在(ゴルジ関連分子など)を加味した3Dモデルを作製することが可能となった。
    4. SEMによるオルガネラ観察法の開発とその応用について: ①オスミウム浸軟法(細胞内をダイレクトに観察できる唯一の手法)、②切片SEM法(切片をSEMで観察する方法)、③連続切片SEM・3D再構築法(基板に載せた樹脂包埋連続超薄切片をSEMで観察後、目的構造を再構築する手法)、④CLEM法(光顕像と電顕像の分解能ギャップを埋める手法)などを解説し、オルガネラ研究への応用を報告した。

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  • 先端的3Dイメージング技法によるゴルジ装置の新たな形態学的基盤構築

    2019年

    公益財団法人 秋山記念生命科学振興財団 (研究助成一般) 

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者  資金種別:競争的資金

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  • 新規因子による血管成熟機構の解明と、動脈硬化に対する治療法の開発

    研究課題/領域番号:17H04170  2017年4月 - 2020年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    川辺 淳一, 甲賀 大輔

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    担当区分:研究分担者 

    配分額:16,120,000円 ( 直接経費:12,400,000円 、 間接経費:3,720,000円 )

    血管成熟化を促進する周細胞(PCs)の新規因子Ninjurin 1(Ninj1)を見出した。 また、Ninj1は、周細胞の中の毛細血管幹細胞(CapSCs)において、シュワン細胞への分化を促し、血管に伴走しながら末梢神経が再生され、機能的な成熟血管形成に寄与するという仮説を立てた。 内皮(ECs)・PCsの接着や神経再生を観察できる微小血管チューブデバイスや周細胞特異的Ninj1KOマウスなどを用いて、
    目的1 Ninj1のPCとECとの接着への影響やPCの一つである幹細胞(CapSCs)の神経再生能や血管神経伴走化への関与の二点に着目し、in vitro血管成熟実験とEC/PCから成る微小血管チューブデバイスや神経組織との共培養システムなど医工学連携の中で、Ninj1の血管成熟化の機序解明を目指す。
    ①CapSCsの血管と神経再生能(BVW)の観点でNinj1の血管成熟化作用およびその機序解明 にむけてIn vitro毛細血管構築システムとマウス脊髄後根神経節(DRG)の共培養系システムを構築し、CapSCによる血管構造上に神経軸索伴走化に必要である基礎データーを習得、現在、その機序解析にむけた研究を行っている。
    目的2 Ninj1のVasa vasorum形成や血管リモデリングにおける役割解明むけて、PC特異的Ninj1-knock out(KO)マウスやPC/CapSCs細胞シートを用いた障害血管モデルにおいて血管壁外膜の微小血管の形成や末梢神経再生、血管壁リモデリングへの影響を評価し、微小血管の成熟化という抗動脈硬化治療戦略の妥当性を検討する。
    ①Ninj1KOマウスを作製し、ワイヤ血管障害モデルの作成と障害血管外膜の性状と障害血管リモデリング解析実験を進めている(昨年にひきつづき、その機序解析に関する実験を行っている)。

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  • ゴルジ装置の多様性と成熟過程:3D-SEM法による下垂体前葉形態ライブラリの構築

    研究課題/領域番号:16K08458  2016年4月 - 2020年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(C)  基盤研究(C)

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者 

    配分額:4,680,000円 ( 直接経費:3,600,000円 、 間接経費:1,080,000円 )

    本年度の研究では、平成29年度に引き続き、①成体ラット下垂体前葉ホルモン産生細胞におけるゴルジ装置の3D構造解析を行った:平成29年度では、走査電子顕微鏡(SEM)連続断層像観察・3D再構築法(連続切片SEM法)により下垂体前葉ホルモン産生細胞(GH,PRL,LH,TSH,ACTH細胞)のゴルジ装置の全体像を明らかにした。さらに本年度は、ゴルジ装置だけでなく、この小器官の形態形成に関係が深い中心小体の空間的局在も明らかにすることができた。
    オスミウム浸軟法は、細胞内微細構造を再構築することなく直接SEM観察できるイメージング技法である。そこで、オスミウム浸軟法により各前葉細胞のゴルジ装置のシス・トランスの微細構造解析を行った。その結果、シスの微細構造は扁平な板状の膜に孔が開いた構造を呈しており、その特徴は各細胞に共通していることがわかった。一方、トランスの微細構造は、各ホルモン産生細胞によって多様で、空間的に複雑な構築を呈していた。さらに、各ホルモン産生細胞を正確に同定するため、オスミウム浸軟法と金コロイド標識法を組み合わせた新たな手法の開発も行った。今後は、この最新のイメージング技法も併用しながら、下垂体前葉ホルモン産生細胞の3D微細構造解析を進めていきたい。
    さらに本年度は、②発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞の形態的解析も進めた。樹脂に包埋した下垂体組織切片の連続切片を切削、SEMによる連続切片観察を行っており、順次再構築モデルを作製する予定である。
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  • オートファジーの機能形態学的基盤-隔離膜生成機構の解明に向けて

    研究課題/領域番号:15H04670  2015年4月 - 2018年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    和栗 聡, 甲賀 大輔, 他

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    担当区分:研究分担者 

    配分額:17,420,000円 ( 直接経費:13,400,000円 、 間接経費:4,020,000円 )

    本研究はオートファジー隔離膜の初期構造の同定を目的とした。アミノ酸飢餓誘導によるオートファジーの解析は他グループから発表されたため、対象をマイトファジーに絞った。その結果、鉄欠乏誘導性マイトファジーにおいて、ミトコンドリア表面における隔離膜伸長がミトコンドリアの部分隔離に重要であること、および近傍の小胞体が前駆体となる可能性を示すことができた。また、隔離膜の構造を走査型電子顕微鏡で観察することに成功し、次の研究に繋げることができた。さらに、創傷治癒過程の線維芽細胞および癌カヘキシアで見られる萎縮筋線維において、オートファジー・リソソーム分解系が重要な働きを担うことを示唆した。

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  • 先端的な3Dイメージング技法によるゴルジ装置の全体像とその多様性の解明

    研究課題/領域番号:26860128  2014年4月 - 2017年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 若手研究(B)  若手研究(B)

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者 

    配分額:3,380,000円 ( 直接経費:2,600,000円 、 間接経費:780,000円 )

    本研究では、array tomography法を新たに開発した。この手法を用いることで、これまで解析が困難であった空間的に複雑な形状を呈するゴルジ装置の3D全体像の解析が可能となった。その結果、ゴルジ装置の3D形状は多様であり、細胞種によって様々であることがわかった。また、この小器官が一つの連続した構造体であり、細胞質の広領域を占めることも示すことができた。さらに、蛍光イメージングとオスミウム浸軟法を組み合わせた相関顕微鏡観察法により、去勢後の性腺刺激ホルモン産生細胞のゴルジ装置の形態変化の解析を行った。

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  • 先端的な3Dイメージング法によるゴルジ装置の全体像とその多様性の解明

    2014年4月 - 2016年3月

    若手研究(B)

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    ゴルジ装置が細胞の機能に果たす重要性に比して、その構造の多様性と複雑性については不明な点も多い。そこで本研究は、先端的な 3D 技法を駆使して、光学顕微鏡レベルと電子顕微鏡レベルを結び付けたゴルジ装置の立体微細構造解析を行う。具体的には、ゴルジ装置の良く発達した下垂体性腺刺激ホルモン産生細胞、膵外分泌細胞、精巣上体管細胞などを用い、超薄連続切片を走査電子顕微鏡を用いて 3D 再構築する新しい手法を確立し、ゴルジ装置の立体像を明らかにする。さらに光顕免疫組織化学と走査電子顕微鏡の相補解析法を用い、ゴルジ装置の複雑な構造の中の極性(シス・トランス)を明らかにし、細胞の機能に関連したゴルジ装置の形状の多様性について明らかにする。

  • 走査電顕マイクロダイセクション法の確立と生物応用

    研究課題/領域番号:24659081  2012年4月 - 2014年3月

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 挑戦的萌芽研究  挑戦的萌芽研究

    牛木 辰男, 甲賀 大輔, 中島 真人

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    担当区分:研究分担者 

    配分額:3,900,000円 ( 直接経費:3,000,000円 、 間接経費:900,000円 )

    本研究では、ステレオ走査電子顕微鏡(走査電顕)内で自由に遠隔操作できる高性能のマニピュレータを用いて、細胞や組織の立体微細構造をより詳細にできるためのマイクロダイセクション法を開発しその応用を試みた。
    その結果、マイクロダイセクションに適した組織の試料作製法を考案し、多様な組織の顕微解剖の可能性を示した。また、針のほかに、マイクロ剪刃やマイクロ鉗子を搭載した2台のマニピュレータを利用することで、より多様なダイセクションが可能になった。

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  • 凍結切片法を用いた新しい走査電子顕微鏡試料作製法の開発

    2012年

    新潟大学塚田医学奨学金 

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者  資金種別:競争的資金

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  • 走査プローブ顕微鏡による生体微細構造機能解明法の新展開

    研究課題/領域番号:21390051  2009年 - 2011年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    牛木 辰男, 星 治, 甲賀 大輔, 中島 真人, 岩田 太

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    担当区分:研究分担者 

    配分額:18,720,000円 ( 直接経費:14,400,000円 、 間接経費:4,320,000円 )

    本研究では、走査型プローブ顕微鏡の医学・生物学分野への更なる応用を目指し、とくに顕微解剖学分野の研究に益する次の3つの観察法の開発とその応用を行った。1)液中リアルタイムイメージング法の開発と顕微解剖学応用2)走査型イオン伝導顕微鏡法の開発と顕微解剖学応用3)マニピュレーション法の開発と顕微解剖学応用これにより、液中での細胞や組織の高分解能・三次元構造機能イメージングと微細解剖を可能にした。

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  • 走査型電子顕微鏡の新しい手法によるゴルジ装置の立体微細構造機能解析

    研究課題/領域番号:21790176  2009年 - 2010年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 若手研究(B)  若手研究(B)

    甲賀 大輔

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    担当区分:研究代表者 

    配分額:3,900,000円 ( 直接経費:3,000,000円 、 間接経費:900,000円 )

    本研究では、光学顕微鏡的手技と走査電子顕微鏡観察法を効果的に組み合わせた、高分解能三次元形態観察法を新たに関発した。この手法は、下垂体前葉のような多数の細胞が混在する組織において特に有効であり、これまで困難であった「走査電顕による下垂体前葉細胞の同定」が可能となった。さらに、各下垂体前葉細胞のゴルジ装置の立体微細構造と機能の関係を超高分解能走査電顕により詳細に解析した。

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  • 細胞分裂における染色体の動態と高次構造に関する顕微形態機能解析

    研究課題/領域番号:18390058  2006年 - 2008年

    日本学術振興会  科学研究費助成事業 基盤研究(B)  基盤研究(B)

    牛木 辰男, 星 治, 甲賀 大輔

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    担当区分:研究分担者 

    配分額:16,780,000円 ( 直接経費:14,200,000円 、 間接経費:2,580,000円 )

    細胞分裂時における染色体の挙動と構造変化は、遺伝情報(DNA)の運搬と分配を考える上できわめて重要である.そこで、本研究では、染色体の形成(凝縮)、分配(染色分体形成)、消失(脱凝縮)のメカニズムを、染色体の構造的側面から解析した.その結果、染色体は分裂後期まで凝縮を続けること、中期染色体には凝縮度の部位差があること、この部位差が、染色体タンパク質の局在と関連していること、また分裂期前のDNA合成のタイミングとも関連していることが明らかになった.

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担当経験のある科目(授業)

  • 骨学実習

    2015年 - 現在 機関名:旭川医科大学

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  • 組織学

    2015年 - 現在 機関名:旭川医科大学

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  • 組織学実習

    2015年 - 現在 機関名:旭川医科大学

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  • 組織学実習

    2008年 - 2014年 機関名:新潟大学

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  • 組織学

    2008年 - 2014年 機関名:新潟大学

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社会貢献活動

  • NHK科学番組 「体感! 神秘の体内ツアー」出演

    2024年3月

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    NHK科学番組に出演し、電子顕微鏡の魅力、体のミクロの世界を紹介した。

  • 体験学習事業(旭川西高SSH)

    2024年1月

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    高校生に電子顕微鏡の世界を紹介した。

  • NHK Eテレ「ヴィランの言い分」皮膚画像提供

    2023年12月

  • エコチルサイエンスIN旭川医大 ~人の体の仕組みを知ろう!

    2023年11月

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    旭川医大で行われたアウトリーチ活動。
    電子顕微鏡の実機を使った組織・細胞のミクロの世界を紹介した。

  • 会いに行ける科学者フェス

    2023年10月

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    秋葉原UDXで行われたアウトリーチ活動。
    電子顕微鏡の実機を持ち運び、ミクロの世界を紹介した。

  • NHK『ヒューマニエンス~40億年のたくらみ~「#80.免疫」』画像提供

    2023年8月

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    NHK科学番組に電子顕微鏡の画像を提供した。

  • わくわくサイエンス

    2023年6月

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    電子顕微鏡の実機をサイパルに持ち運び、旭川市民へ電子顕微鏡の世界を紹介した。アウトリーチ活動

  • バビブベボディ 出前授業 「カラダ大冒険!」 画像提供

    2023年3月

  • 超・進化論  NHKスペシャル『超・進化論』第3集・微生物  「すべては微生物から始まった ~見えないスーパーパワー~」 画像提供

    2023年1月

  • ヒューマニエンスQ(クエスト)シーズン2 画像提供

    2023年1月

  • ヒューマニエンス テーマ「糖」 画像提供

    2022年10月

  • ヒューマニエンス~40億年のたくらみ~  「遺伝子1 ~多様性はジャンクから」 画像提供

    2022年8月

  • ヒューマニエンス 老化ーその宿命に抗うか従うか 画像提供

    2022年7月

  • わくわくサイエンス

    2022年6月

  • ミクロの不思議展

    2022年6月

  • ヒューマニエンス「ホルモン」画像提供

    2022年3月

  • バビブべボディ オンライン授業 カラダ大冒険!食べ物のゆくえを追え 2時間目 栄養分はどこへいく? 電子顕微鏡画像提供

    2022年2月

  • NHK WORLD TV 「Science View(サイエンス・ビュー)」番組出演

    2021年12月 - 2022年12月

  • NHKスペシャル ジェンダーサイエンス (1)「男X女 性差の真実」 電子顕微鏡画像提供

    2021年11月

  • ヒューマニエンス 40億年のたくらみ 「山中伸弥スペシャル iPS細胞と私たち」 (NHK BS) 画像提供

    2021年10月

  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「細胞」  2020年3月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「神経」  2020年3月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル「食の起源」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  第5集「美食」  2020年2月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「DNA」  2019年12月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「下垂体」  2019年12月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「鼻」  2019年12月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「すい臓」  2019年12月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル「食の起源」 への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  第2集 「塩」 人類をとりこにする“本当の理由”  2019年12月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「皮膚」  2019年8月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「口」  2019年8月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「耳」  2019年8月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「目」  2019年8月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル 人体Ⅱ 遺伝子へ画像提供

    役割:情報提供

    NHK  第2集 “DNAスイッチ”が 運命を変える  2019年5月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル 人体Ⅱ 遺伝子へ画像提供

    役割:情報提供

    NHK  第1集 あなたの中の宝物“トレジャーDNA”  2019年5月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ 「きょうの健康」へ画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「あなたの体を総チェック!②症状別!血液で病気を見つけ出せ」  2019年4月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • 2019年 医学会総会 名古屋 NHKスペシャル「人体」からだの不思議を語る!

    2019年4月

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    NHKスペシャル「人体」に提供した画像についてや、「ミクロの世界の魅力」について、トークショーというスタイルで子供達や一般の方々に紹介した。

  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「赤ちゃん」  2019年3月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「肝臓」  2019年3月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「血」  2019年3月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • 市民公開講座 (順天堂大学 本郷・お茶の水キャンパス)

    役割:講師

    「魔法の虫メガネ、走査電子顕微鏡の魅力」の講演  2019年3月

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    種別:講演会

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「小腸」  2018年12月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「肺」  2018年12月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「脂肪」  2018年12月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • 「電子顕微鏡のまち・米子市」ミクロの探索コーナー開設記念講演会

    役割:講師

    「魔法の虫メガネ 走査電子顕微鏡の魅力~NHKスペシャル人体収録エピソード~」の講演  2018年9月

     詳細を見る

    種別:講演会

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  • 「電子顕微鏡のまち・米子市」ミクロの探索コーナー開設記念講演会

    2018年9月

     詳細を見る

    魔法の虫メガネ 走査電子顕微鏡の魅力~NHKスペシャル人体収録エピソード~、と題して、小学生から大人まで幅広い年代層に、電子顕微鏡の魅力について講演した。

  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「骨」  2018年8月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHK Eテレ (NHKエデュケーショナル) 子供向け医学教育番組 「バビブベボディ」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK Eテレ  「腎臓」  2018年8月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル「人体」 への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  NHKスペシャル「人体」第6集「“生命誕生”見えた!母と子 ミクロの会話」  2018年3月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • 国立科学博物館(上野) 特別展 「人体-神秘への挑戦-」への画像提供

    役割:情報提供

    国立科学博物館、NHK  特別展 「人体-神秘への挑戦-」  2018年3月 - 2018年6月

     詳細を見る

    種別:その他

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  • NHKスペシャル「人体」への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  NHKスペシャル「人体」第4集「万病撃退!“腸”が免疫の鍵だった」  2018年1月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル「人体」 への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  NHKスペシャル「人体」「“骨”が出す! 最高の若返り物質」  2018年1月

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    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • 「ミクロの不思議展2」

    役割:企画

    旭川医科大学  電子顕微鏡のパネル展  2017年12月

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    種別:その他

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  • 「人体精密図鑑」への画像提供と監修

    役割:情報提供

    NHK  「人体精密図鑑」  2017年11月

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    種別:インターネット

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  • 「ミクロの不思議展」

    役割:企画

    旭川医科大学  電子顕微鏡のパネル展  2017年10月

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    種別:その他

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  • 「ミクロの世界を体験しよう」

    役割:インタビュアー, 企画

    旭川医大、旭川市教育委員会、日立ハイテクノロジーズ  子供たちの「電子顕微鏡の体験企画」  2017年10月

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    種別:セミナー・ワークショップ

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  • NHKスペシャル「人体」 への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  NHKスペシャル「人体」第一集「“腎臓”が寿命を決める臓が寿命を決める」  2017年10月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル「人体」 への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  NHKスペシャル「人体」プロローグ  2017年9月

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • NHKスペシャル「人体」 への画像提供

    役割:情報提供

    NHK  NHKスペシャル「人体」第2集「驚きのパワー!“脂肪と筋肉”が命を守る」  2017年

     詳細を見る

    種別:テレビ・ラジオ番組

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  • サイエンス・リーダーズ・キャンプ

    役割:講師, 実演

    旭川医科大学  講師・実験実習の担当。基調講演「現代生命科学研究における先端研究技術の原理と応用; (電子顕微鏡の原理・医学生物学応用)」についての講演  2016年

     詳細を見る

    種別:講演会

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  • テレビ新潟企画 第7回新潟ジュニアメディカルフォーラム

    役割:講師

    新潟大学  「ミクロの世界をたのしもう」の講演  2014年10月

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    対象: 小学生, 中学生

    種別:講演会

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  • 高大連携事業

    役割:講師

    栃木県立大田原女子高等学校  「走査電子顕微鏡で眺めたからだ」の講演  2013年

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    種別:出前授業

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  • サイエンス・パートナーシップ・プログラム

    役割:講師

    旭川医科大学  「走査電子顕微鏡で眺めてからだ」(旭川東栄高校、旭川南高校)の講演  2012年

     詳細を見る

    種別:出前授業

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  • サイエンス・パートナーシップ・プログラム

    役割:講師

    旭川医科大学  「走査電子顕微鏡で眺めてからだ」(旭川東栄高校、旭川南高校)の講演  2011年

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    種別:出前授業

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  • 高大連携事業

    役割:講師

    新潟南高校  「走査電子顕微鏡で見た体の世界」の講演  2011年

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    種別:出前授業

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  • サイエンス・パートナーシップ・プログラム

    役割:講師

    旭川医科大学  「走査電子顕微鏡で眺めてからだ」(旭川東栄高校、旭川南高校)の講演  2010年

     詳細を見る

    対象: 高校生

    種別:出前授業

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  • 高大連携事業

    役割:講師

    新潟県立燕中等教育学校  「走査電子顕微鏡で眺めたからだ」の講演  2010年

     詳細を見る

    種別:出前授業

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  • サイエンス・パートナーシップ・プログラム

    役割:講師

    旭川医科大学  「走査電子顕微鏡で眺めてからだ」 (旭川東栄高校、旭川西高校)の講演  2009年

     詳細を見る

    種別:出前授業

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メディア報道

  • トークショー NHKスペシャル「人体」からだの不思議を語る! テレビ・ラジオ番組

    NHK Eテレ  第1部 「人体」の貴重な映像はどう生まれたか!(45分) 第2部 ミクロの世界の魅力とは?(45分)  2019年4月

     詳細を見る

学術貢献活動

  • 日本顕微鏡学会代議員 国際学術貢献

    2023年4月 - 2025年3月

  • オーガナイザー・座長

    2022年4月 - 2023年3月

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    第128回日本解剖学会総会・全国学術集会 
    「オルガネラ・イメージングの電顕マルチモダリティ」
    シンポジウム企画・座長

  • 日本顕微鏡学会・和文誌「顕微鏡」編集委員

    2019年4月 - 現在

  • Biomedical Research誌編集委員 国際学術貢献

    2019年4月 - 現在

  • 日本解剖学会・若手研究者の会 

    2019年3月 - 現在

  • 日本顕微鏡学会 技術認定委員

    2015年4月 - 現在

  • 日本顕微鏡学会 走査電子顕微鏡分科会 幹事

    2015年4月 - 2023年3月

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