Organization
School of Medicine General Education Biology
External link
KUSAKABE Hirokazu
Degree
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博士（保健学） ( 1999.7 杏林大学 )
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修士（理学） ( 1992.3 弘前大学 )
Research Interests
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spermatozoa
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preservation
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配偶子
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ゲノム
-
精子
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保存
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Gamete
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Genome
Research Areas
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Environmental Science/Agriculture Science / Environmental effects of radiation
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Environmental Science/Agriculture Science / Biological resource conservation
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Environmental Science/Agriculture Science / Environmental effects of chemicals
Education
-
弘前大学大学院 理学研究科 生物学専攻
1990.4 - 1992.3
Country： Japan
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Hirosaki University
1986.4 - 1990.3
Country： Japan
Research History
-
Asahikawa Medical College Professor
2024.4
-
Asahikawa Medical College School of Medicine Associate Professor
2012.4
-
Asahikawa Medical College School of Medicine Lecturer
2008.7 - 2012.3
-
Asahikawa Medical College School of Medicine Assistant Professor
2007.4 - 2008.6
-
Asahikawa Medical College Teaching Associate
2002.4 - 2007.3
-
Asahikawa Medical College School of Medicine
2002.4 - 2007.3
-
Institute for Biogenesis Research Asistant Reseracher
1999.10 - 2001.10
-
Assistant Researcher, Institute for Biogenesis
1999 - 2001
-
(財)食品薬品安全センター秦野研究所 研究技術員
1992.4 - 1999.9
-
Researcher, Food and Drug Safety Center/Hatano
1992 - 1999
Professional Memberships
-
Environmental Epi-Genomics Society
2022.4
-
財団法人染色体学会
1994.10
-
日本環境変異原学会
1993.10
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日本環境変異原ゲノム学会
-
JAPAN SOCIETY FOR REPRODUCTIVE MEDICINE
-
染色体学会
Studying abroad experiences
-
1999.10 - 2001.9 Institute for Biogenesis Research, University of Hawaii at Manoa
Papers
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Chromosomal integrity of freeze-dried karyoplasts in mice. International journal
Hirokazu Kusakabe
Cryobiology 119 105247 - 105247 2025.6
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A reliable technique for karyotyping mouse oocytes prepared by a gradual fixation/air-drying method followed by multicolour FISH. International journal
Toshiaki Hino, Hirokazu Kusakabe
Biology open 12 ( 12 ) 2023.12
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Hiroyuki Tateno, Miwa Tamura‐Nakano, Hirokazu Kusakabe, Noritaka Hirohashi, Natsuko Kawano, Ryuzo Yanagimachi
Molecular Reproduction and Development 88 ( 12 ) 793 - 804 2021.12
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Production of mouse fetuses using spermatozoa exposed temporarily to high temperature or continuously to room temperature after freeze-drying in Na+-free/K+-rich EGTA buffer Reviewed
Hirokazu Kusakabe
Cryobiology 87 105 - 109 2019.4
-
Prevention of high-temperature-induced chromosome damage in mouse spermatozoa freeze-dried using Ca2+ chelator-containing buffer alkalinized with NaOH or KOH Reviewed
Hirokazu Kusakabe, Hiroyuki Tateno
CRYOBIOLOGY 79 71 - 77 2017.12
-
マウス第二極体ゲノムに由来する混倍数性受精卵のゲノム動態とその発生能
日野 敏昭, 日下部 博一, 立野 裕幸
Journal of Mammalian Ova Research 31 ( 2 ) S59 - S59 2014.4
-
マウス第二極体に由来する混倍数性受精卵のゲノム動態
日野 敏昭, 日下部 博一, 立野 裕幸
日本生殖医学会雑誌 58 ( 4 ) 378 - 378 2013.10
-
Production of offspring after sperm chromosome screening: an experiment using the mouse model Reviewed
H. Watanabe, H. Kusakabe, H. Mori, R. Yanagimachi, H. Tateno
HUMAN REPRODUCTION 28 ( 2 ) 531 - 537 2013.2
-
Chromosomal stability of second polar bodies in mouse embryos Reviewed
Toshiaki Hino, Hirokazu Kusakabe, Hiroyuki Tateno
JOURNAL OF ASSISTED REPRODUCTION AND GENETICS 30 ( 1 ) 91 - 98 2013.1
-
マウスおよびヒト凍結乾燥精子ゲノムの高温耐性獲得に関する研究
日下部 博一
旭川医科大学研究フォーラム 13 ( 1 ) 86 - 88 2013
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Chromosomal stability of second polar bodies Reviewed
Hino T, Kusakabe H, Tateno H
J Assisted Reprod Genet 30 91 - 98 2013
-
Characterization of chromosomal damage accumulated in freeze-dried mouse spermatozoa preserved under ambient and heat stress conditions Reviewed
Hirokazu Kusakabe, Hiroyuki Tateno
MUTAGENESIS 26 ( 3 ) 447 - 453 2011.5
-
Structural chromosomal aberrations, aneuploidy, and mosaicism in early cleavage mouse embryos derived from spermatozoa exposed to gamma-rays Reviewed
Hiroyuki Tateno, Hirokazu Kusakabe, Yujiroh Kamiguchi
INTERNATIONAL JOURNAL OF RADIATION BIOLOGY 87 ( 3 ) 320 - 329 2011.3
-
Shortening of alkaline DNA unwinding time does not interfere with detecting DNA damage to mouse and human spermatozoa in the comet assay Reviewed
Hirokazu Kusakabe, Hiroyuki Tateno
ASIAN JOURNAL OF ANDROLOGY 13 ( 1 ) 172 - 174 2011.1
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Chromosomal integrity and DNA damage in freeze-dried spermatozoa Invited Reviewed
Hirokazu Kusakabe
Reproductive Medicine and Biology 10 ( 4 ) 199 - 210 2011
-
Varidity of a simple vitrification technique for chromosome study of mouse one-cell embryos. Reviewed
Hino T, Kusakabe H, Tateno H
Chrom Sci 13 ( 3 ) 45 - 48 2010
-
マウス精子を用いる単一細胞ゲル電気泳動法（コメットアッセイ）および染色体分析法による遺伝的傷害の検出感度比較.
日下部 博一
旭川医科大学研究フォーラム 9 ( 1 ) 77 - 78 2009
-
Mouse and human spermatozoa can be freeze-dried without damaging their chromosomes (in Russian)
Kusakabe H., Yanagimachi R., Kamiguchi Y.
Hum Reprod (Specialized Edition, in Russian) 5 82 - 88 2008.4
-
Mouse and human spermatozoa can be freeze-dried without damaging their chromosomes Reviewed
H. Kusakabe, R. Yanagimachi, Y. Kamiguchi
HUMAN REPRODUCTION 23 ( 2 ) 233 - 239 2008.2
-
Fertilizability and chromosomal integrity of frozen-thawed Bryde's whale (Balaenoptera edeni) spermatozoa intracytoplasmically injected into mouse oocytes Reviewed
H. Watanabe, H. Tateno, H. Kusakabe, T. Matsuoka, Y. Kamiguchi, Y. Fujise, H. Ishikawa, S. Ohsumi, Y. Fukui
ZYGOTE 15 ( 1 ) 9 - 14 2007.2
-
Kusakabe H, Kamiguchi Y
Mutation research 564 ( 2 ) 195 - 200 2004.12
-
Chromosomal integrity of freeze-dried mouse spermatozoa after Cs-137 gamma-ray irradiation Reviewed
Kusakabe H, Kamiguchi Y
MUTATION RESEARCH-FUNDAMENTAL AND MOLECULAR MECHANISMS OF MUTAGENESIS 556 ( 1-2 ) 163 - 168 2004.11
-
Ability to activate oocytes and chromosome integrity of mouse spermatozoa preserved in EGTA Tris-HCl buffered solution supplemented with antioxidants Reviewed
Kusakabe H, Kamiguchi Y
THERIOGENOLOGY 62 ( 5 ) 897 - 905 2004.9
-
Freeze-dried sperm fertilization leads to full-term development in rabbits Reviewed
JL Liu, H Kusakabe, CC Chang, H Suzuki, DW Schmidt, M Julian, R Pfeffer, CL Bormann, XC Tian, R Yanagimachi, XZ Yang
BIOLOGY OF REPRODUCTION 70 ( 6 ) 1776 - 1781 2004.6
-
Long-term preservation of mouse spermatozoa after freeze-drying and freezing without cryoprotection Reviewed
MA Ward, T Kaneko, H Kusakabe, JD Biggers, DG Whittingham, R Yanagimachi
BIOLOGY OF REPRODUCTION 69 ( 6 ) 2100 - 2108 2003.12
-
Analysis of sperm chromosomes in infertile males with teratozoospermia. (Polish) Reviewed
Szczygiel MA, Kusakabe H, Wiland E, Kurpisz M
Ginekol Pol 74 108 - 115 2003
-
Intracytoplasmic sperm injection is more efficient than in vitro fertilization for generating mouse embryos from cryopreserved spermatozoa Reviewed
MA Szczygiel, H Kusakabe, R Yanagimachi, DG Whittingham
BIOLOGY OF REPRODUCTION 67 ( 4 ) 1278 - 1284 2002.10
-
Separation of motile populations of spermatozoa prior to freezing is beneficial for subsequent fertilization in vitro: A study with various mouse strains Reviewed
MA Szczygiel, H Kusakabe, R Yanagimachi, DG Whittingham
BIOLOGY OF REPRODUCTION 67 ( 1 ) 287 - 292 2002.7
-
Relevance of chemical structure and cytotoxicity to the induction of chromosome aberrations based on the testing results of 98 high production volume industrial chemicals Reviewed
H Kusakabe, K Yamakage, S Wakuri, K Sasaki, Y Nakagawa, M Watanabe, M Hayashi, T Sofuni, H Ono, N Tanaka
MUTATION RESEARCH-GENETIC TOXICOLOGY AND ENVIRONMENTAL MUTAGENESIS 517 ( 1-2 ) 187 - 198 2002.5
-
マウス凍結乾燥精子の卵細胞質内精子注入法(ICSI法)
日下部 博一
秦野研究所年報 25 102 - 108 2002
-
Adult murine neurons: their chromatin and chromosome changes and failure to support embryonic development as revealed by nuclear transfer Reviewed
T Osada, H Kusakabe, H Akutsu, T Yagi, R Yanagimachi
CYTOGENETIC AND GENOME RESEARCH 97 ( 1-2 ) 7 - 12 2002
-
Maintenance of genetic integrity in frozen and freeze-dried mouse spermatozoa Reviewed
H Kusakabe, MA Szczygiel, DG Whittingham, R Yanagimachi
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA 98 ( 24 ) 13501 - 13506 2001.11
-
ヒト体細胞および精子における変異原物質誘発染色体転座に関する研究 Reviewed
日下部博一
杏林医学会雑誌 30 ( 4 ) 573 - 574 1999.9
-
Chromosome-type aberrations induced in chromosome 9 after treatment of human peripheral blood lymphocytes with mitomycin C at the G(0) phase Reviewed
H Kusakabe, T Takahashi, N Tanaka
CYTOGENETICS AND CELL GENETICS 85 ( 3-4 ) 212 - 216 1999
-
Comparative studies of MCL-5 cells and human lymphocytes for detecting indirect-acting clastogens Reviewed
K Yamakage, H Kusakabe, N Tanaka
MUTATION RESEARCH-GENETIC TOXICOLOGY AND ENVIRONMENTAL MUTAGENESIS 412 ( 1 ) 55 - 61 1998.1
-
Re-evaluation of chromosomal aberration induction on nine mouse lymphoma assay 'unique positive' NTP carcinogens Reviewed
A Matsuoka, K Yamakage, H Kusakabe, S Wakuri, M Asakura, T Noguchi, T Sugiyama, H Shimada, S Nakayama, Y Kasahara, Y Takahashi, KF Miura, M Hatanaka, M Ishidate, T Morita, K Watanabe, M Hara, K Odawara, N Tanaka, M Hayashi, T Sofuni
MUTATION RESEARCH-GENETIC TOXICOLOGY 369 ( 3-4 ) 243 - 252 1996.8
-
Detection of neocarzinostatin-induced translocations in human sperm chromosomes using fluorescence in situ hybridization of chromosome 2 Reviewed
H Kusakabe, K Yamakage, N Tanaka
MUTATION RESEARCH-GENETIC TOXICOLOGY 369 ( 1-2 ) 51 - 58 1996.7
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Revised karyotypes of the Japanese Northern Red-backed Vole, Clethrionomys rutilus mikado. Reviewed
Obara Y, Kusakabe H, Miyakoshi K, Kawada S
J Mamm Soc Japan 20 125 - 133 1995
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Cytogenetic study on the adriamycin-induced Robertsonian fusion in three species of Clethrionomys Reviewed
Hirokazu Kusakabe
1992.3
MISC
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FOR HOW LONG DOES THE SECOND POLAR BODY OF THE MOUSE-FERTILIZED EGG RETAIN GENETIC STABILITY?
T. Hino, H. Kusakabe, H. Tateno
FERTILITY AND STERILITY 98 ( 3 ) S163 - S163 2012.9
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Occurrence of structural chromosome aberrations, aneuploidy and mosaicism in mouse early cleavage embryos derived from spermatozoa with γ-ray-induced DNA damage
TATENO Hiroyuki, KUSAKABE Hirokazu, KAMIGUCHI Yujiroh
28 ( 2 ) S112 2011.4
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Fertilizability and chromosomal integrity of frozen-thawed bryde's whale (Balaenoptera edeni) spermatozoa intracytoplasmically injected into mouse oocytes
H. Watanabe, H. Tateno, H. Kusakabe, Y. Kamiguchi, Y. Fujise, H. Ishikawa, S. Ohsumi, Y. Fukui
REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT 19 ( 1 ) 306 - 306 2007
-
KUSAKABE Hirokazu, KAMIGUCHI Yujiroh
Chromosome science 9 ( 4 ) 119 - 119 2006
-
Freeze-dried sperm fertilization leads to full-term development in rabbits
JL Liu, H Kusakabe, CC Chang, H Suzuki, DW Schmidt, M Julian, R Pfeffer, CL Bormann, XC Tian, R Yanagimachi, XZ Yang
BIOLOGY OF REPRODUCTION 70 ( 6 ) 1776 - 1781 2004.6
-
Long-term preservation of mouse spermatozoa after freeze-drying and freezing without cryoprotection
MA Ward, T Kaneko, H Kusakabe, JD Biggers, DG Whittingham, R Yanagimachi
BIOLOGY OF REPRODUCTION 69 ( 6 ) 2100 - 2108 2003.12
-
Long-term preservation of freeze-dried and frozen without cryoprotection mouse spermatozoa.
MA Szczygiel, T Kaneko, H Kusakabe, DG Whittingham, R Yanagimachi
BIOLOGY OF REPRODUCTION 68 209 - 209 2003
-
Analysis of sperm chromosomes in inferile males with teratozoospermia"jointly worked"
Gynekol Pol. 74, 108-115 2003
-
Intracytoplasmic sperm injection is more efficient than in vitro fertilization for cryopreserved spermatozoa.
MA Szczygiel, H Kusakabe, DG Whittingham, R Yanagimachi
BIOLOGY OF REPRODUCTION 66 196 - 196 2002
-
Adult murine neurons: their chromatin and chromosome changes and failure to support embryonic development as revealed by nuclear transfer
T Osada, H Kusakabe, H Akutsu, T Yagi, R Yanagimachi
CYTOGENETIC AND GENOME RESEARCH 97 ( 1-2 ) 7 - 12 2002
-
Comparison of the development of andrognetic and parthenogenetic mouse embryos.
H Akutsu, H Tateno, H Kusakabe, R Yanagimachi
BIOLOGY OF REPRODUCTION 62 253 - 254 2000
Presentations
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マウス凍結乾燥ミニ卵の作製と染色体ダメージについて
日下部博一
第69回日本生殖医学会学術講演会・総会 2024.11
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マウス凍結乾燥ミニ卵の γ - トコトリエノール処理による染色体ダメージの軽減
日下部博一
日本環境変異原ゲノム学会
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フリーズドライ精子作製用の精子処理液のｐHと精子染色体異常の誘発について
日下部博一, 立野裕幸
財団法人染色体学会第６５回（2014年度）年会 財団法人染色体学会
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室温保存したマウス凍結乾燥精子の染色体正常性
日下部 博一, 上口勇次郎
第51回日本不妊学会北海道地方部会・学術講演会
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「生殖医療および遺伝子資源保存のための基礎研究」
日下部 博一
検査技術科学特別講演
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Maintenance of genetic integrity in frozen and freeze-dried mouse spermatozoa. Invited International conference
Kusakabe H, Szczygiel MA, Whittingham DG, Yanagimachi R
Sperm Club Meeting (National Cooperative Program on Mouse Sperm Cryopreservation) 2001.7
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室温・高温保存したフリーズドライ精子における染色体異常誘発の抑制 Invited
日下部 博一
日本卵子学会 2016.5
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キレート剤を使用するマウス精子の凍結乾燥保存法とゲノム正常性の維持
日下部博一, Szczygiel MA, Whittingham DG, 柳町隆造
日本不妊学会北海道地方部会総会・学術講演会 2003.3
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凍結乾燥処理後のマウス精子における染色体正常性の維持について
日下部博一, Szczygiel MA, Whittingham DG, 柳町隆造
染色体学会第53回大会 2002.10
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抗酸化物質を含む凍結乾燥用溶液中で室温保存したマウス精子の正常性
日下部博一, 上口勇次郎
日本不妊学会北海道地方部会総会・学術講演会 2004.3
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ビタミンEで処理した非凍結保存精子の卵活性化能および染色体正常性について
日下部博一, 上口勇次郎
日本環境変異原学会第32回大会 2003.11
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生殖医療および遺伝子資源保存のための基礎研究 Invited
日下部博一
検査技術科学特別講演 2004.6
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ガンマ線照射された凍結乾燥精子の染色体正常性
日下部博一, 上口勇次郎
日本環境変異原学会第33回大会 2004.11
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緑茶カテキンで処理されたマウス精子の染色体分析
日下部博一, 上口勇次郎
染色体学会第55回大会 2004.11
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Separation of motile populations of mouse spermatozoa from various inbred and hybrid mice. International conference
Szczygiel MA, Kusakabe H, Whittingham DG, Yanagimachi R
Annual Meeting of the Society for Reproduction and Fertility 2001.11
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A novel medium for the maintenance of chromosome integrity in freeze-dried mousespermatozoa. International conference
Kusakabe H, Szczygiel MA, Whittingham DG, Yanagimachi R
Annual Meeting of the Society for Reproduction and Fertility 2001.11
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マウスにおける精子凍結乾燥法の改良と受精卵の染色体分析結果が示す同法の特徴
日下部博一, 上口勇次郎
染色体学会第57回大会 2006.11
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室温保存したマウス凍結乾燥精子の染色体正常性
日下部博一, 上口勇次郎
日本不妊学会北海道地方部会総会・学術講演会 2005.11
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高温保存した凍結乾燥精子の単一細胞ゲル電気泳動法（コメットアッセイ）によるDNA損傷の検出
日下部博一
第51回日本不妊学会北海道地方部会・学術講演会 2009.2
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マウスおよびヒト精子または凍結乾燥精子を用いるコメットアッセイのDNA傷害検出能について
日下部博一
日本環境変異原学会第回37回大会 2008.12
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凍結乾燥精子の高温耐性獲得と染色体異常の誘発抑制
日下部博一, 立野裕幸
染色体学会第62回大会 2011.11
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高温（50℃）で保存した凍結乾燥精子におけるDNA損傷と染色分体交換の高頻度誘発
日下部博一
日本環境変異原学会第回37回大会 2009.11
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フリーズドライ精子における染色体異常生成とその抑制 Invited
日下部博一
第58回日本生殖医学会 2013.11
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冷蔵および室温保存したマウス凍結乾燥精子における染色体分析
日下部博一, 上口勇次郎
染色体学会第56回大会 2005.10
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Chromosomal damage in motile and immotile mouse spermatozoa treated in vitro with green tea catechin, (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) International conference
Kusakabe H, Kamiguchi Y
9th International Conference on Environmental Mutagens 2005.9
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照射コムギ粉飼料給餌によるラット骨髄細胞と末梢血中における数的異常誘発
田中憲穂, 山影康次, 若栗忍, 日下部博一
日本環境変異原学会第21回大会 1992.11
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ヤチネズミ属3 種のアドリアマイシン誘導ロバートソン型動原体融合について
日下部博一, 小原良孝
日本動物学会東北支部大会 1992.7
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染色体バンディングおよび FISH 法による染色体異常の継代変化の推移
日下部博一, 田中憲穂
日本環境変異原学会第22回大会 1993.11
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マウス末梢血を用いた小核試験による染色体の数的異常誘発物質の検出
山影康次, 若栗忍, 日下部博一, 田中憲穂
日本環境変異原学会第21回大会 1992.11
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マウス末梢血を用いた小核試験による染色体の数的異常誘発物質の検出
山影康次, 中川ゆづき, 若栗忍, 日下部博一, 坂本京子, 澁谷徹, 西村茂, 奥苑正光, 田中憲穂
日本環境変異原学会第24回大会 1995.11
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第2 染色体ペインティングによる化学物質誘発ヒト精子染色体転座の検出
日下部博一, 立野裕幸, 上口勇次郎, 田中憲穂
日本環境変異原学会第23回大会 1994.11
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抗癌剤ネオカルチノスタチン（NCS）の転座誘発
日下部博一, 宮下めぐみ, 山影康次, 田中憲穂
染色体学会第48回大会 1997.9
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FISHを用いたヒトリンパ球異数性細胞の検出
日下部博一, 山影康次, 若栗忍, 中川ゆづき, 田中憲穂
日本環境変異原学会第24回大会 1995.11
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マイトマイシン誘発ヒトリンパ球染色体転座について
日下部博一, 宮下めぐみ, 井上みゆき, 高橋俊孝, 田中憲穂
日本環境変異原学会第26回大会 1997.12
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Neocarzinostatin-induced chromosome translocations in human sperm and peripheral blood lymphocytes International conference
Kusakabe H, Yamakage K, Tanaka N
7th International Conference on Environmental Mutagens 1997.9
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FISH によるマイトマイシンＣ誘発ヒト9番染色体異常の分析
日下部博一, 井上みゆき, 高橋俊孝, 田中憲穂
染色体学会第49回大会 1998.11
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110 種の既存化学物質における染色体異常試験結果の総括および問題点
日下部博一, 山影康次, 若栗 忍, 高橋俊孝, 佐々木澄志, 中川ゆづき, 井上みゆき, 渡辺美香, 橋本恵子, 田中憲穂
日本環境変異原学会第27回大会 1998.11
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L5178Y tk+/- 細胞を用いた突然変異と染色体異常誘発の予測
若栗忍, 山影康次, 日下部博一, 吉永紀久子, 田中憲穂
日本環境変異原学会第23回大会 1994
Industrial property rights
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哺乳類由来の細胞又は精子の凍結乾燥用溶液
日下部博一
-
哺乳類由来の細胞又は精子の凍結乾燥用溶液
日下部 博一
Awards
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最優秀演題賞
2009.2 第51回日本不妊学会北海道地方部会 高温保存した凍結乾燥精子の単一細胞ゲル電気泳動法（コメットアッセイ）によるDNA損傷の検出
日下部 博一
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第51回日本生殖医学会北海道地方部会 優秀演題賞
2009.2 日本生殖医学会
日下部博一
Research Projects
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凍結乾燥ミニ卵を用いるミトコンドリア置換法の安全性向上に関する研究
2024.4 - 2027.3
日本学術振興会 科学研究費助成事業 基盤研究(C)
ミトコンドリア病をもたらす変異遺伝子を次世代に持ち込ませないための生殖医療技術「ミトコンドリア置換法」に、凍結乾燥卵（凍結乾燥ミニ卵）を使用することが可能かどうかを検討する。
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Freeze-dying of mammalian oocytes
Grant number：20K06457 2020.4 - 2023.3
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C) Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Grant amount：\3,770,000 （ Direct Cost: \2,900,000 、 Indirect Cost：\870,000 ）
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哺乳類のフリーズドライ精子における高温耐性獲得に関する研究
2013.4 - 2016.3
日本学術振興会 科学研究費補助金（基盤研究Ｃ）
日下部 博一
Authorship：Principal investigator Grant type：Competitive
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マウスおよびヒト凍結乾燥精子ゲノムの高温耐性獲得に関する研究
2011.10 - 2012.10
旭川医科大学
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マウス精子を用いる単一細胞ゲル電気泳動法（コメットアッセイ）および染色体分析法による遺伝的傷害の検出感度比較
2007.10 - 2008.10
旭川医科大学
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マウス精子および体細胞の室温保存法に関する基礎的な研究
Grant number：16681020 2004.4 - 2007.3
日本学術振興会 科学研究費助成事業 若手研究(A)
日下部 博一
Grant amount：\7,540,000 （ Direct Cost: \5,800,000 、 Indirect Cost：\1,740,000 ）
昨年までの研究により、新しいマウス精子凍結乾燥用溶液として考案した修正型ETBS(50 mMEGTA、100mM Tris-HCl(pH 7.4))に精子を前処理(プレインキュベーション、4℃または25℃で4〜7日間)することにより、凍結乾燥精子の染色体正常率が70-90%と高くなり、その受精卵の発生能は1年間冷蔵しても変わらず、また1年間室温保存した精子からも胎仔が得られることもわかっている。研究の最終年度である本年度は、この修正型凍結乾燥溶液の適用範囲を調べるため、健常なヒトの精子を予め37℃で保温した修正型ETBSに加え、スイムアップ(10分間)後に回収し凍結乾燥した。1ヶ月以内で冷蔵した凍結乾燥精子をマウスの除核卵に注入し、精子染色体を形成させてその染色体異常の頻度を調べた。その結果、マウスの場合とは異なり、ヒト精子を凍結乾燥する場合はプレインキュベーション時間をとらなくても染色体正常率が86-95%と十分に高いことから、凍結乾燥後の精子染色体の正常性を維持するためのプレインキュベーション時間の長さは種によって異なることが示唆された。加えて通常の染色レベルで正常と判断された20個の精子染色体像をランダムに選び、キナクリンマスタード染色によるQバンド分析も行ったところ、全ての凍結乾燥精子の染色体において転座、欠失などの異常は認められなかった。更に、精子が除核卵の中で中期染色体を形成できる頻度は新鮮精子(非凍結)よりも凍結乾燥精子の方が圧倒的に高く、新鮮精子が5-64%であったのに対し、凍結乾燥精子では86-92%(プレインキュベーション時間:4時間以内)となった。ヒト凍結乾燥精子の染色体正常性の維持とマウス凍結乾燥精子の発生能の高さは、本法が大型哺乳類の精液サンプルに対しても安全かつ対応可能であることを示唆しており、本結果ついては現在論文投稿中である。
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Study on reproductive technology to maintain the genetic integrity of freeze-dried spermatozoa and somatic cells in mammalian species
2004
Hirokazu Kusakabe
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Genotoxicity test of food additives
2002.4 - 2003.3
Food and Drug Safety Center
Hirokazu Kusakabe
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Changeable aspects of radiation-induced chromosome aberrations during early development of the zygote
Grant number：13680615 2001 - 2004
Japan Society for the Promotion of Science Grants-in-Aid for Scientific Research Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
KAMIGUCHI Yujiroh, TATENO Hiroyuki, KUSAKABE Hirokazu
Grant amount：\3,700,000 （ Direct Cost: \3,700,000 ）
To understand changeable aspects of radiation-induced chromosome aberrations (CAs) during the embryonic development, mouse pie-implantation and post-implantation embryos derived from gamma-irradiated (2,4 Gy) spermatozoa were studied cytogenetically and embryologically.
1.Ahighly successful method for chmmosome preparation of mouse 1-cell to 4-cell embryos was established.
2.A total number of 1,170 zygotes were karyotyped in irradiated and control groups. The zygotes with structural chromosome aberrations (SCAs) showed a clear dose-dependent increase, reaching 36% in the 4 Gy group. No dose-dependent increase of aneuploidy was found. The most predominant type of CA was chromosome breaks/fragments (60%) which was followed by dicentric chromosomes (25%).
3.A total number of 396 2-cell embryos were karyotyped. The incidence of embryos with SCAs was nearly the same as that in 1-cell embryos, but about 90% of them converted into mosaic-type SCA. The incidence of SCA-derived aneuploidy was also significantly high in the irradiated groups.
4.A total number of 537 4-cell embryos were karyotyped. A great majority of the embryos with SCA were of mosaic-type. The incidence of aneuploidy became decreased, suggesting that they converted again into mosaic type.
5.About 50 to 60% of embryos with SCA reached to blastocyst stage, showing no developmental arrest or delay.
6.Chromosome analysis was carried out with 2,240 somatic cells obtained from 85 live embryos (10〜11-day old). None of embryos was found to be chromosomally abnormal. The incidence of post-implantation death was significantly high in the irradiated groups, almost all the dead embryos were being in the state of degenerated conceptus. These suggest that selection of the embryos with CA mainly takes place immediately after implantation.
7.No increase of embryonic death or developmental anomalies was observed in 16〜17-day-old fetuses (survey of 52 pregnant females), supporting the above-mentioned suggestion.
Other
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【メディア報道】マウスの凍結乾燥精子の染色体正常率を改善し、世界で初めてヒトの凍結乾燥精子の染色体分析を行った研究内容が、2007年12月12日の読売新聞（夕刊）と翌日12月13日の北海道新聞（朝刊）の記事として紹介された。
2007.12
Social Activities
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旭川ウェルビーイング・コンソーシアム連携公開講座等事業部会委員
2023.4
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令和2年度HOKKAIDOサイエンスフェスティバル
2021.1 - 2021.2
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平成30年度北海道旭川西高等学校「SSH課題研究中間報告会」および「SSH課題研究発表会」
2018.11 - 2018.12
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「あさひかわオープンカレッジ」（主催：旭川ウェルビーイング・コンソーシアム事務局）の講師
2017.11
Media Coverage
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ヒト精子 凍結乾燥し保存・再生 旭川医大 水で戻し正常状態に Newspaper, magazine
北海道新聞 2007.12
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精子保存に「凍結乾燥」 日米大学チーム成功 不妊治療の予備的手法に Newspaper, magazine
読売新聞（夕刊） 2007.12